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실험Q&A    3,583건 정확도순 날짜순
Q. western blot 통하여 인산화 protein H2A.X 발현 평가하려는데요,,,
T3 세포에 산화적인 스트레스(hydroxyl radical) 주고 24시간 배양후 NP-40으로 lysis(4시 간) 시킨후 단백질을 추출하여 15% 아클라마이드 겔에 전기영동한후 5% nonfat milk 로 1시간 30분 blocking 후에 3회 0.1% tween 20 ...
A.  답변 감사합니다. 그럼 SDS가 첨가하게 되면 bradford 용액으로 단백질 정량이 안되지않나요? 그리고 첨가하려면 NP-40 에 첨가하라는 말씀인 가요?>
답변 2  |  2010.01.19
Q. H&E staining 도와주세요
시그마에서 파는 mayer''s hematoxylin을 사용했습니다. hematoxlin 을 0.1%로 사용했는데 시약을 만들면 보리차색보다 조금 진한색을 띄고 염색을하고나면 아무런 색이 나타나지 않습니다. eosin 염색하면 바로 ...
A.  hematoxylin의 종류가 2가지 있는데 HCL 스텝을 거쳐야하는가 아닌가로 나뉘어 집니다. 시약을 잘 알아보고 다시 메소드 잡아보세요!! 저는 Hemato 1min -tap water- Eosin 1min -tap water 합니다.
답변 4  |  2006.03.14
Q. h2o2의 항산화제? scavenger??
보는 실험 진행 중입니다. 마지막에 h2o2와 함께 h2o2를 부셔버리는 chemical을 함께 처리해서 결과를 내고 싶은데 마땅한 걸 못 찾고 있습니다. ros 관련 실험 전문가들의 조언 부탁드립니다^ ...
A.  hydrogen peroxide를 부셔버리는 chemical이라 말씀하시는게 antioxidant molecule들을 말씀하시는 것 같은데....보통 catalase처리를 많이 하곤 합니다~ 그외에 알려진 다른것들로는 SOD나 GSH같은 것들이 있어요~
답변 2  |  2009.04.01
Q. liver H&E staining 분석에 대해 질문드립니다!ㅋ
위해 formalin에 고정해두었던 조직을 10㎛로 frozen section하여 H&E staining 후, 관찰하던 중에 의문이 생겨 질문을 올립니다. (참고로 첨부하는 사진의 배율은 지금으로써는 정확히 알지 못하겠고ㅠㅠ; ...
A.  첫번째 사진에서 구멍은 혈관이구요... 길고 떡볶이 모양처럼 생긴 원통 모양도 혈관이 옆면으로 잘려진 것입니다.. 지방구의 형성은 이렇게 되지 않습니다.. 지방구는 간에서 거품처렁 동글동글한것 ...
답변 4  |  2011.06.27
Q. H2O2 농도 관련 계산질문입니다.
H2O2를 이용해서 apoptosis를 보려고 하는데요, sigma에서 파는 30%짜리 H2O2를 이용하려고 하거든요 그래서 이걸 1M로 희석해서 보관하고 사용할때 나눠 쓰려 하는데 여기서 질문입니다. H2O2의 경우 분자량이 ...
A.  저도 H2O2로 실험했었는데 저는 8.8M로 생각하고 실험했습니다.
답변 3  |  2014.11.22
Q. Histone gamma-H2AX에대해 궁금한점이 있습니다.
H2AX라는 histone이 DNA double strand break이 일어난 부분의 H2A 와 change가 되는 것인지 아니면 break가 일어난 곳에 H2AX가 달라붙는 것인지 궁금합니다... 부탁드립니다 ...
A.  DSB가 일어난 위치의 Histone H2AX가 phosphorylation되는 겁니다. 일반적으로 인산화된 단백질은 phospho- 라고 붙이지만, H2AX는 gamma라고 붙입니다.
답변 1  |  2016.07.19
Q. H2O2 treat 농도 계산 질문이요 ㅠㅠ
0% H2O2를 최종농도 1mM로 하려고 합니다. H2O2는 9.8M로 잡았어요 (계산하면 9.79M인데 쉽게 사용하기 위해서ㅠ) 제가 농도 계산에 약해서 선배가 알려주신대로 하고 있는데 MTT 결과를 보면 답이 없습니다 ...
A.  stock을 serial dilution할때, PBS말고 그냥 DW로 해보시고요, 세포처리 전의 stock 농도를 1M 혹은 0.5M로 만드 ... 같습니다. 10mM 을 10배 희석해서 세포에 처리하시면, vehicle (PBS 혹은 DW) 비율이 너무 큽니다 ...
답변 4  |  2018.07.05
Q. H2O2에 민감한 cell을 찾고있습니다.
합니다. 현재 저희가 가지고있는 세포주는 HepG2, RAW 264.7, HUVEC, LNCap 정도가 있습니다. 혹시 이중에 민감한 세포주가 있다던가 혹은 다른 세포주를 추천해주셨으면 합니다. (__ ...
A.  조직들입니다. 그렇지만 ROS 증가에 따른 스토리라면 전 HepG2 를 선택하겠습니다. 이유는 간기능 항노화, 항항산화와 매칭이 쉽게 될것도 같습니다 ...
답변 1  |  2015.01.19
Q. H2O2 농도 희석 방법
이번에 H2O2 농도에 따른 세포독성 실험 (MTT)를 준비하고 있습니다. 다름이 아니라 H2O2 농도를 아래와 같이 설정하여 MTT 를 해보려고 하는데 희석 방법을 잘 모르겠습니다 ㅜ ㅜ 제가 갖고 있는 H2O2는 ...
A.   먼저, 9.8M을 1M로 희석합니다. : 9.8M 용액 102 ul + DW 898 ul = 1M H2O2를 1ml 제조. 그 다음 10배 희석한 중간 희석액(100 mM)을 하나 더 만듭니다. : 1M 용액 100ul + DW or 배지 900 ul =100mM H2O2 1ml 제조. 2. 1.에서 만든 10 ...
답변 2  |  2018.10.30
Q. 세포에 10mM H2O2 treatment했는데 전혀 죽지를 않습니다.
(1ml DMEM + 0.86ul H2O2, H2O2는 junsei 35%입니다)로 24h treatment 후 harvest하였는데 세포가 안 죽습니다.... control과 비교하여 아무런 차이가 없습니다. 유통기한이 지난 것은 아닙니다. 원액통은 시약장에서 ...
A.  세포에 따라서 민감도가 다를 수 있습니다. 다양한 농도로 MTT를 먼저 수행한 후에 농도를 설정해서 실험을 진행하는 것이 바람직합니다. 단순히 하나의 농도로 세포사멸 실험을 바로 시작하는 것은 ...
답변 3  |  2018.10.12
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