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실험Q&A    1,552건 정확도순 날짜순
Q. DNA합성 질문입니다.
단백질과의 결합여부를 테스트 해보기 위해 DNA(길이 20~40mer)를 합성해보려고 합니다. DNA 작업을 안하는 실험실이라 DNA쪽 작업은 cloning위해 primer 주문해 PCR 정도 해본게 다인데요. 1. double strand로 합성 ...
A.  EMSA를 하실려나 보군요... 20~40mer dsDNA도 합성 가능한데요...대부분 service하는 회사역시 상보적인 ssDNA(primer)합성해서 dsDNA를 만드는 것으로 알고 있습니다. 간단합니다. ssDNA 상보적으로 두개 주문하시 ...
답변 1  |  2009.05.04
Q. DNA합성 어느 곳이 좋은가요/
안녕하세요. 이제 막 대학원 진학한 학생입니다. 다름이 아니고 제가 원하는 gene을 얻기 위해 PCR을 수없이 시도 해봤지만 얻을 수가 없더라구요. 그래서 제가 원하는 gene을 사려고 봤더니 전체로 파는 ...
A.  답변주신분들 감사드려요~
답변 3  |  2014.02.12
Q. Human DNA polymerase에 관해.
다름이 아니라 제가 요즘 Polymerase 별로 DNA합성 비교 실험을 하느라 Polymerase, Reverse trancriptase등을 구입하고 있는데요, HIV-RT, M-MLV-RT, Taq polymerase, Polymerase 1 (E-coli origin) 같은 것들은 다행이도 팔고 ...
답변 0  |  2010.05.23
Q. DNA 합성 관련해서 질문드립니다
안녕하세요, 랩 선배도 후배도 없는 나 홀로 고군분투하고있는 석사 꼬꼬마입니다. 제가 타겟하고 있는 유전자의 CDS 서열을 알고 있습니다. 이번에 real time pcr을 하게 되었는데, 절대정량을 하기 위해 ...
A.  gene synthesis라고 하지요. 근데 윗분 말씀처럼 타겟 유전자가 많다면 비용이 꽤 많이 들겁니다. 저같으면 차라리 Addgene에서 타겟 유전자가 subclone되어있는 plasmid가 있는지를 확인하고 이를 분양받을 것 ...
답변 2  |  2016.03.23
Q. PCR할때 DNA 합성속도요....
하는데, taq 효소를 쓰는데요... dna합성속도가 어느정도 되나요? 90°에서 30초 변성시키고 60°정도에서 30초 재생시키고, 72°에서 30초에서 1분정도 extension 하거든요... 보통 30초정도마다 1000bp 정도 ...
A.  저는 보통 넉넉잡아 1분당 1kb 정도라고 계산하고 elongation time을 잡아줘요
답변 1  |  2012.03.31
Q. double strand oligomer 합성해 주는 회사??
18bp정도의 double strand DNA합성해 주는 회사 있는지요??
A.  온도 내리는 것은 PCR 기계에 셋팅을 해놓으셔도 됩니다.
답변 4  |  2007.11.20
Q. cDNA합성 후 튜브 바닥의 침전물..
;;; 혹 cDNA 합성 후 일정시간, 온도로 incubation을 해주어야 DNA합성된게 용해되는건데 제가 그걸 안하고 있는건지요?? 아니면 DNA농도가 너무 높아서 다 녹지 못하는거고,, 반응이 없는건 DNA농도가 너무 ...
A.  RNA는 0.1-1ug수준을 가지고 합니다. 너무 많은 RNA는 오히려 cDNA합성을 저해할 수 있으므로 무조건적으로 많은 양을 가지고 실험을 하는 것은 좋지 않습니다 ...
답변 2  |  2008.03.15
Q. real time PCR 질문이 있습니다!
질문이 PCR 관련해서 질문이 있습니다.. 1. DNA합성할 때, 2 ug/ul에 맞춰서 RNA를 넣고 total volume을 20 ul로 맞춰서 합성을 하는데요. 이러면 만들어진 DNA는 100 ng/ul가 되는거고 real time PCR 할 때 0.5 ul 사용하면 ...
A.  어떤 kit 를 사용하느냐에 따라 합성양이 다를 수 있습니다. RNA 를 동일한 양을 썻다해서 cDNA 역시 동일하게 합성된다는 보장이 없습니다. 제 RT-PCR 조건을 예를들면 다음과 같습니다. Sample 1개당 다음과 ...
답변 1  |  2019.11.21
Q. PCR 관련..
PCR하고 있습니다. PCR은 총 4번하고 지금까지 두번은 PCR로 DNA합성이 되었는데 세번째 PCR이 되지않습니다. 세번째 PCR을하면 DNA사이즈가 0.5kb에서 band가 나타납니다.denaturation은 보통94도애서5분으로했고 ...
A.  머리 복잡해 자세히 모르겠고.. 잘안된단건 딴분께 패스.. insert는 사이클 25~30만 하세요. 예전에 s1 nuclease 처리해보니 사이클 증가하면 엄청나게 부서짐을 알수 있어요. 폴리모피즘 볼땐 많아도 무관하 ...
답변 1  |  2007.08.08
Q. thymidin에 대해 좀 자세히 알고 싶어요
thymidine이 항산화제 역할을 하고 있다는 것은 논문이나 책에서 본것 같은데 구체적인 실험 방법에대 ... 어떤 기작으로 가능한지 설명좀 부탁드립니다 (책에는 dna합성에 연관이 있다고 하던데.. ...
답변 0  |  2010.09.06
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DNA 합성기(DNA)
모델명 없음 | 한남대학교 산학협력단 | 2004.05.11
중합효소연쇄반응기(PCR)
Palm cycler | (재)전남생물산업진흥원 | 2008.01.25
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