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실험Q&A    1,759건 정확도순 날짜순
Q. 혈액에서의 DNA purification
이번에 새로운 실험프로젝트로 넘어오면서 혈액에서 DNA를 뽑는데요 만약 세포가 다 죽어있는 혈액의 sample이라면 DNA가 뽑히지 않나요? 지금 지방 타 대학병원에서 의뢰한 sample을 받았는데 택배회사의 ...
A.  셀이 죽어서 DNA가 뽑히지 않았다기보다는 셀이 죽은 후 DNA가 빠져나왔고 그게 깨져서 그런 것 같습니다. 셀이 죽고 안죽고랑은 상관없습니다. (Apoptosis에 의한 셀데스가 아닌 경우에..)
답변 1  |  2012.06.25
Q. DNA extraction 후 purification 과정에서 도와주세요
cell lysis를 한 후, 다시 DNA purification을 하고 있습니다 Lysis ... 떨어지기만 합니다ㅠ DNA purification 과정 좀 도와주세요 ...
A.  답변 감사합니다! 제가 잘 몰라서 그러는데ㅠ A260/280 1.8~ 과 1.5 정도는 data값이 차이 나지는 않나요? real-time PCR 할 때 1.5~ 까지는 괜찮은건가요? -------------------------------------------------- 청개구리 명품남 ...
답변 2  |  2013.10.30
Q. Phage display에서 DNA purification
있습니다. M13 파지에서 DNA purification을 해서 DNA 시퀀싱 ... 메뉴얼속 DNA purification 방법은 시퀀싱 서비스 의뢰에는 적합하지 않아서 잘 모르겠다는 식으로 말하더군요. 그래서 이번에 DNA 샘플을 ...
A.   농도와 purity가 낮아서 안된다는 말이 참 웃기네요. 게다가 ssDNA라 PCR이 안된다니...만약 농도가 낮다면 더 많은 양의 phage를 얻어서 DNA prep을 하시면 될 거 같습니다. 또한, 문제가 되고 있는 purity는 ...
답변 3  |  2017.03.29
Q. plasmid DNA maxi kit 사용한 DNA purification
안녕하세요. DNA purification 실험중인 석사생입니다. 현재 pEGFP-N1이라는 유전자를 증폭하는 실험을 qiazen 사의 plasmid endofree maxi kit을 이용하여 실험하였습니다. 그런데 처음하는 실험이다보니 제가 제대로 ...
A.  XbaI 말고 다른 enzyme 사용해 보세요 XbaI에 * 표시 되어있습니다. methylation이 일어나서 enzyme이 잘 않먹을 것입니다. cloning된 site를 아시면 그중 하나의 enzyme으로 확인하는게 제일 좋습니다.
답변 4  |  2016.03.14
Q. kit로 DNA purification후에 gel purification할때 질문입니다 ㅠ
MiniBEST로 DNA purification거의 끝난 상태인데요 곧 gel purification을 해야하는데 DNA 100ul를 지금 37도에서 incubation중입니다(프로토콜대로) 겔 영동한후에 well을 잘라서 어디에 담아서 gel purification을 ...
A.  되지 않아 서요.... '곧 gel purification을 해야하는데 DNA 100ul를 지금 37도에서 incubation중입니다(프로토콜대로) 겔 영동한후에 well을 잘라서 어디에 담아서 gel purification을 진행해야하는지....'에서 왜 DNA 10 ...
답변 4  |  2016.01.12
Q. CsCl gradient DNA purification시 CsCl quality
gradient DNA purification을 통해 closed form DNA와 nicked form DNA를 나누고자 합니다. 이 때 사용되는 CsCl의 종류를 어떤 것들을 사용하시는지 궁금합니다. 현재 centrifugation 후 DNA band는 나오는데 분리되지 않는 ...
A.  예전에 돈이 없을땐 CsCl 사용 후에 야러번 재생해서 사용했습니다. 다시말하면 순도가 좀 낮아도 별문제 없다는 거지요. CsCl 밴딩을 했는데 밴드가 하나라면 supercoi form을 잘 뽑았다는 의미입니다. ...
답변 1  |  2014.07.21
Q. 안녕하세요 DNA purification solution의 조성이 궁금합니다....
DNA purification을 하면 보통은 kit를 사용해서 하는걸로 알고있습니다. 제가 아직 학부다 보니, 기본부터 충실하게 배우고 있어서 추출도 PCI를 사용해서 뽑는 연습을 하고 있습니다. PCR을 하고, ...
A.  http://www.plantmethods.com/content/6/1/1 링크된 논문이 도움이 될 겁니다.
답변 1  |  2014.06.10
Q. DNA purification
DNA purification실험을 하였습니다. 빈상태로 centrifuge를 돌리는 과정에서 무언가 column에 끼여서 상층액의 액체가 내려 오지 못했는데요. 저는 WASHING 과정에서 잘못해서 불순물이 끼였다고 생각하고 ...
A.  Plasmid DNA를 정제하신다는 전제 하에 답변드립니다. 컬럼에 옮긴다는 것은 셀 깬 후 neutralization하여 침전물을 만든 후, 센트리퓨지 돌려서 침전물 다 가라앉게 하고 상층액만 따서 옮기셨다는 거죠?? ...
답변 2  |  2016.04.21
Q. dna purification
dna purification에 대해 배우고 있는데 purification(elution)의 종류에는 뭐가 있나요?? electroelution이랑 spin을 이용한 elution 이 두가지 외 다른 방법이 있는 건가요??
A.  electroelution이랑 spin column을 이용한 방법외에도 여러가지 시약을 사용한 방법이 있습니다. 한번 찾아 보시고 원리라든지 이해되지 않는 부분에 대하여 질문하시면 여러 고수님들이 답변을 해주실겁니다.
답변 1  |  2018.09.30
Q. paraffin embedded tissue 에서 추출한 DNApurification kit 에 대한 문의
embedded tissue 에서 DNA를 추출하였는데 methylation ... 하는데요 잘 진행이 안 되어서 DNA purification 을 한 다음 modification 을 하려고 하는데 좋은 kit를 추천해 주시면 감사하겠습니다 ...
A.  파라핀절편에서 DNA 추출 후 PCR 및 bisulfite conversion효율은 키아젠 키트가 거의 절대적으로 좋았습니다. 파라핀에서 DNA추출은 DNA 수율이 중요한게 아니라 추출후 DNA의 integrity가 더 중요합니다.
답변 3  |  2013.04.24
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