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정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. dig high prime DNA labeling 사용해 보신분? |
| 하고 있는 중인데 dig를 사용해서 lableing하고 있습니다.
여러번 실험을 해도 blot에 밴드가 나타나지 않는군요...
실험해보신분 실험방법 좀 가르쳐 주세요...
저는 roche홈페이지에서 다운받은 ... |
| A. dig로 노던을 하구 있는데 밴드 잘 나옵니다
Labeling 은 저는 Dig RNA labeling kit를 이용했구요, 메뉴얼대로 하면 잘 됩니다
Northern할 경우 메뉴얼은 그냥 일반적인 방법이고 조건을 잡아가셔야합니다
인내를 ... |
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답변 2 | 2006.03.17 |
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| Q. DIG-labelled Northern hybridization |
| Dig으로 labeling하여 노던을 하고 있는데, signal이 잘 잡히지 않고 spotty background가 생깁니다.
혹시 DIG으로 노던하시는 분들의 조언을 듣고 싶습니다. |
| A. 고려하는 점외에 사소하지만 중요한
점들입니다. Dig manual뒷쪽에 있는 trouble shooting을 잘 보셔서 문제점을
획인해보시고 제가 말씀드린것도 신경써서 해보십시요.
그리고 당연한 말이지만 원하는 ... |
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답변 1 | 2002.08.15 |
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| Q. cloning시 enzyme dig. |
| cloning을 하였는데 PCR product는 Kpn/Xho로 잘라서 사용하였고..(아래 그림 참조..)
vector는 Kpn/Sal로 자른후에 ... Xho/Sal로 자르면 되나요?
아님 Kpn/Xho/Sal을 한번에 처리해서 dig이 가능한가요?
감사합니다. ... |
| A. Xho/Sal로 자르면 되나요?
아님 Kpn/Xho/Sal을 한번에 처리해서 dig이 가능한가요?
-> 둘다 불가능합니다. XhoI-SalI으로 fusion이 되어 CTC GAC가 만들어졌는데 이는 XhoI도 SalI도 인식을 못하고 잘리지도 않습니다. ... |
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답변 1 | 2008.06.17 |
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| Q. DIG 방법으로 labelling? |
| 실험실 사정상 RI를 사용할수가 없어서
결론적으로 DIG를 이용하여 식물의 gDNA를 이용하여 labelling rhk dection 을 효율적이고 빨리 확인할수 있는 kit나 방법 좀 ... |
| A. 사용합니다.
EMSA랑 southern, northern 해봤는데 잘 나옵니다.
dig은 roche제품꺼 사용했구요...나머지 component는 따로 구입해서 사용했구요..
kit는 비싸서리~ ㅋ
원리만 알면 굳이 kit살 필요 없죠..roche가서 ... |
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답변 1 | 2007.09.03 |
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| Q. DIG을 사용한 Northern blot결과에 대해서.. |
| 다시해야하나 하고 생각중입니다.
여러분중에 DIG을 사용하여 노던 불랏의 결과를 낸 분이 있으시면 혹시 어떻게 하셨는지 알려 주세요..
감사합니다 ... |
| A. 예전에도 나왔던 내용이었는데요, 로슈에서 나온 DIG system에서 제일 중요한 step은 hybridization인데, manual에 있는 high SDS buffer system을 이용하시면 좋은 결과를 얻게 될 거예요. 한번 시도해 보세요.. |
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답변 1 | 2008.03.14 |
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| Q. DIG으로 probe를 만드는 방법 |
| DIG으로 probe를 만들어 노던과 인 사이추 하이브리다이제이션을 할려고 합니다. 방법이나 프로토콜을 알려주셨으면 감사하겠습니다. |
| A. DIG system은 먼저 답변 하신 분 말처럼 BM에서 다합니다.
독점이거던요
그래도 혹시 실험적인 조언이 필요하시면요,
메일 주세요
DIG로 Northern하고 southern은 해봤거든요
labeling은 random하고 3-end labeling하고요 |
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답변 2 | 2000.03.02 |
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| Q. DIG kit |
| nf-ke 측정할려고하는데요..
PCR DIG Probe Synthesis Kit를 사용해서 probe를 만들어서...
그다음 확인은 아가로즈 겔로 하는건가요?
그리고 여서 template는 그냥 노멀한 셀이나 조직에서 분리한 DNA를 ... |
| A. DIG probe : Northern이나 Souther 용도
Cell 핵단백질, PAGE : Western
전혀 다른 두가지 내용이 뒤죽박죽으로 섞여 있습니다.
실험에 대한 전반적인 이해가 먼저 있어야 할 듯 합니다. |
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답변 1 | 2009.09.01 |
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| Q. Dig 으로 Northern 하기... |
| 혹시 로? 제품 Dig hybrid 방법으로 detection 해보신분 조언부탁드려요
다름이 아니라
제가 속한 연구실에서는 암실이 확보되지 못한 관계로 NBT/BCIP 를 이용해서 membrane에 color로 band 를 확인합니다.
그동안 ... |
| A. SPEED 님
잘 된다 하심은... 역시나 x-ray 발광방법을 말씀하시는 것이지요?
membrane에 band 가 보이는 방법은 아닌것이지요?
확인 부탁 드립니다. 혹시 제가 hybrid 온도를 잘못 맞춘게 아닌가 생각도 들어서 ... |
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답변 4 | 2009.09.10 |
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| Q. nortern(DIg)에 대해서 잘아시는분..주목! |
| band는 눈을씻고 찾아봐도 없었습니다.
제가 들은바로는 dig으로 labelling해서 detection하는 시스템이 결과가 잘안나온다그러던데 사실인지... 저처럼 이렇게 실험해보신분이 있으면 ... |
| A. nothern은 정말 안되더군요.
개인적으로 RI나 ECL을 싫어해서 DIG을 사용하고는 있지만 nothern은 하지마세요.
차라리 힘들더라두 다른 방법을 찾거나 radio labelling을 하는것은 훨씬 빠른 실험결과를 볼수 ... |
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답변 1 | 2002.12.26 |
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| Q. DIG-labeled Southern |
| 전혀 밴드가 나오지 않았어요.. ㅜㅜ
평범한 DNA ladder가 DIG system의 Southern에 detection될 수 있는지,
그리고 genomic Southern이 너무 안되는데, 혹시 mannual에 없는, 좋은 tip이 있는지 가르쳐주세요.. ... |
| A. 저도 처음할때 똑같은 실수를 하였었습니다. 저같은경우에는 평범한 DNA Marker를 사
용하였을때는 detection이 되지 않았습니다. 저같은경우에는 detection이 되지 않지
는 않고 band가 진하지 않고 중간에서 ... |
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답변 1 | 2008.06.07 |
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