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'CRISPR/Cas9' 관련 검색광고입니다.
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실험Q&A    80건 정확도순 날짜순
Q. CRISPR-Cas9 질문입니다
실험실에 CRISPR-Cas9 실험을 setting 하려하는데 어려움이 있습니다 ㅠ 우선 대부분의 논문이나 CRISPR-Cs9 plasmid를 판매하는 회사에서 보면 target gene이 insert된 CRISPR-Cas9 Plasmid가 세포에 들어갔는지는 GFP 또는 ...
A.  안녕하세요~ 개인적으로 쪽지나 메일(lwr200@hanmail.net) 등으로 연락주시면 최대한 도와드리겠습니다.
답변 1  |  2015.02.06
Q. crispr library plasmid 제작질문이요
crispr library가 무엇인지 어떠한 개념인지 잘 모르겠습니다. 그리고 cas9에 의하여 target DNA가 잘리고 repair system에 의해서 ... 만한 논문이 있으시면 추천해 주시면 감사합니다. 더불어 CRISPR 실험을 ...
답변 0  |  2015.02.04
Q. CRISPR/Cas9 gRNA design (px260 or 334)
안녕하세요. CRISPR gRNA design 관련 문의드리려고 합니다. gRNA를 px260 or 334 에 넣어 사용하고 싶은데요. px330 의 경우에는 23nt(PAM포함)를 넣으면 되서 http://crispr.mit.edu/ 사이트에서 확인했는데 px260는 30nt ...
A.  저는 px260 or 334을 사용하지는 않아서 두경우의 실험결과 차이가 궁금하지만,,, 제 생각엔 px260 라면, target site gene 23nt 앞의 7nt 을 연장해서 넣으면될것 같네요.
답변 1  |  2015.06.10
Q. CRISPR-Cas9 system 질문이요
gene을 insert 할 수 있는지 이해가 가지 않습니다 ㅠ 또, CRISPR system에서 DNA 이중 가닥 중에 하나의 가닥을 target하면 하나의 가닥만 cut을 하는건지 하나의 가닥을 target 해도 DNA 이중나선 모두를 cut하는 ...
A.  Non-homologous End Joining 으로 insertion되게 됩니다. DNA repairing system에 의해 잘려진 DNA가 다시 붙게될때 주변에 있는 DNA fragment를 낮은 확률로 random하게 끼워붙이는 현상을 이용하는것 입니다. gRNA에 의해 ...
답변 1  |  2015.02.04
Q. 유전자편집(CRISPR)에 관해 궁금한게 있습니다
예를들어 암유발 유전자를 갖고태어날 제 자식은 CRISPR를 이용하여 수정 전 그 유전자를 편집하여 특정 암이 안걸리게 할 수 있는것이고, 이미 성인인 제가 특정 암이 걸릴 것은 CRIPSR로도 어떻게 할 수 ...
A.  이론적으로는 말씀하신 모든 것이 가능하지만 현재 기술로는 말씀하신 모든 것이 불가능합니다. 간단하게는 효율이 떨어져서 적용이 불가능하다고 말씀드릴 수 있겠습니다. 나중에 효율이 더 높아지 ...
답변 4  |  2015.12.21
Q. [다시질문드립니다] 박테리아 CRISPR-Cas9 system
박테리아용 벡터는 없다고 합니다... 3. 박테리아에서 CRISPR 하는 법이 eukaryotic cell과 유사한지요? 경험자 분 계시면 코멘트 부탁드립니다. 감사합니다 ...
답변 0  |  2018.03.10
Q. bacteria에서 CRISPR-Cas9 준비과정이 궁금합니다.
따로 합성한 뒤에 cell에 트랜스포메이션하는 것인지요? CRISPR 벡터와 함께 섞어서 트랜스포메이션(힛샥) 하면 되는것인지요? 3. gRNA 부위를 합성할 때 PAM (NGG) 을 gRNA 의 3'end에 포함시켜야 하는지요? ...
A.   그 논문 보시면 자세히 프로토콜이 나와있습니다. CRISPR를 가진 cell을 recombinase 발현 시키면서 com cell로 만든 후 gRNA 백터를 넣습니다. 3.이 또한 그 논문에 있으며, (정확히는 기억이 안나서요;;) 20이면 ...
답변 2  |  2018.03.09
Q. CRISPR/Cas9 system_Knocked out cell line에서의 Negative contorl을 만들고 싶은데....
요즘 CRISPR system을 set up 하기 위해서 노력중에 있습니다. 그런데 아직 초보자이다 보니...역시 벽에 부딪히게 되네요. 그래서 다른 분들의 지혜를 얻고자 글을 올립니다. 지금 현재 knock out 된 셀을 ...
A.  보통 킷으로 주문하면 negative control용 plasmid가 따로 오지 않나싶습니다만... 혹시 도움에 될까하여 링크 올려드립니다. https://www.scbt.com/scbt/product/control-crispr-cas9-plasmid
답변 3  |  2017.02.03
Q. Crispr을 배우고 싶습니다.
나온 데이터를 가지고 Crispr-cas9을 적용해보고 싶습니다. Crispr cas가 어떤 시스템인지는 알고 있습니다. 여러 논문에서 나온 방법을 가지고 실험을 수행해보려고하는데 embryo를 mutagenesis 시키는데 좋은 ...
답변 0  |  2015.04.25
Q. CRISPR mutation surveyor assay 관련질문  |  첨부파일 첨부파일
찍어보니깐 자꾸 밴드가 희미하게 나옵니다 ...(사진첨부) CRISPR을 하시는 분들은 아시겠지만 cas가 제대로 작동이 되면 유전자 부분이 잘려나가게 되어 밴드사이즈가 작게나옵니다. 일단 맨처음 ...
A.  High resolution agarose와 TBE 사용해야 합니다.
답변 1  |  2014.09.16
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