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실험Q&A    5건 정확도순 날짜순
Q. cloning 할때 이상해요.
CLONGING 하고 있는데 유전자가 자꾸 잘려 나와요.. RESTION MAPPER 로 NON CUTTER ENZYME 인 것 다 확인 했고요, BLAST 돌려서 그 유전자가 맞다고 뜨는데도 중간에 400-500BP 뻥 비어서 나타납니다. PCR PRODUCT 는 잡 ...
A.  잘린게 아니라면 RNA 시퀀스부터 뻥 뚤려 있는 mRNA는 아닐까요? 이런게 인간유전자 클로닝이라면 유전자 은행에서 full seq DNA를 구매후 클로닝하는것을 추천합니다. 유전자마다 다르지만 약 15만원 정도 ...
답변 1  |  2015.09.24
Q. pcDNA3에서 frame 맞추려고 하는데요...  |  첨부파일 첨부파일
를 vector로 하여 clonging을 해야합니다. 물론 mammalian 세포에 transfection하려고하고요. primer 제작하려고하는데 막히네요. insert를 넣으려고 할때 mammalian 세포 내에서 expression이 제대로 되려면 frame이 맞게 ...
A.  걍 pcDNA3 라면.... insert 제일 앞의 atg부터 된다고 알고 있습니다.. N terminal tag 가 있다면 frame을 맞춰야 되는 것으로 알고 있어요
답변 1  |  2010.12.28
Q. 제한효소 자리를 찾을 수 있는 방법이 있나요?
안녕하세요. 초보 실험자 입니다ㅠㅠ 다름이 아니라... 제가 clonging을 하고, sequencing을 보냈는데, 그 결과를 보고 어떤 restriction enzyme site들이 있는지 혹시 찾을 수 있는 방법이 있나요? 감사합니다.
A.  가지고 있는 enzyme이 자르는 sequence를 알면 어디 있는지 알 수 있죠
답변 5  |  2016.05.17
Q. DNA 크기를 알수있나요?
을 막배우고있습니다. 가지고있는 VECTOR의 크기는 8Kb라고 알고있습니다. clonging해야함 insert의 sequence는 알고있으나 이것이 size가 어떻게 되는지 알지못합니다. 계산하는 방법이 있나요? 감사합니다 ...
A.  알고있는 insert 서열을 이루고 있는 염기(ATGC)의 합이 DNA 크기입니다. 예 : 8kb라는 것은 ATGC의 합이 8,000개 라는 뜻이니다.
답변 2  |  2009.10.20
Q. pBABE-puro vector에 Cloning해서 sequencing 까지 확인했는데 발현이 안되네요ㅜㅜ
답답한 마음에 여기에 질문해 봅니다. pBABE-puro vector에 제 target을 Cloning하여 enzyme cutting과 sequencing확인을 통해 insert가 잘 들어간 것을 확인했습니다. 당연히 잘 발현하겠거니 하고 viral packaging도 하고 ...
답변 0  |  2019.08.16
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