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정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. PCR 2band 이유 |
| 안녕하세요.
저는 지금 세포에 어떤 stimulant를 처리하여 특이 유전자 발현을 확인하는 실험을 하고있습니다.
정확하게는 qPCR을 해야하지만 band 사진이 필요하여 PCR을 하고 있습니다.
그런데, 두번 반복 ... |
| A. mRNA의 alternative splicing처럼 보이네요.
해당 밴드 잘라서 sequencing해보는게 가장 확실할 것 같습니다. |
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답변 1 | 2018.09.07 |
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Q. pcr결과가 자꾸 2BAND ㅜㅜ |  첨부파일 |
| 안녕하십니까?
똑같은 샘플에 각기 다른 조직에 B-ACTIN 을 PCR 하는데
자꾸 3,4,5 번째 SAMPLE에 밴드가 2개 생기는 군요..
결과가 이래서 ANNELING TEMPERATURE 를 2 ℃ 올려해봤는데
똑같은 결과를 얻을 수 밖에 ... |
| A. 제가 돌린 균주만 130개에 Primer만 20개가 넘습니다.
음.. 저런 경우가 아주... 흔한 경우...였답니다 -_-
일단은 그냥 했어요 저렇게;; Main band는 나오니까요.
일단 Sequencing을 보내서 저 녀석의 정체를 알아 ... |
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답변 1 | 2009.10.22 |
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| Q. PCR에서 2band가 뜹니다 ㅠㅠ | 첨부파일 |
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( positivie control로 PCR을 여러번 해보았을 때, 2band가 뜬 적은 없었습니다.. )
제가 원하는 것은 1band로 깨끗하게 나오거나, 안나오는 것입니다
혹시 비슷한 경험이 있으셨던 분이나, 조언해주실 방법이 ... |
| A. 질문자 질문에 답이 이미 나와 있네요,,
단순히 annealing temperature 의 문제로 보입니다. primer의 annealing 온도를 다시 한번 점검 후 PCR 진행하세요, 일반적으로는 Tm 값의 -4로 하라고 하는데요, 하지만 ... |
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답변 1 | 2016.06.02 |
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| Q. MMP2 RT-PCR |
| 1band로 나오는 것 밖에 전 찾지 못하겠어요.
MMP 중 MMP2는 2band로 잡혀야하는 건가요? 그럼 두 밴드 각각이 무엇인지 알 수 있을까 해서요.
고수님들 도와주세요 ... |
| A. 제가 human MMP-2 RT-PCR 한거는 1band로 나옵니다.
primer짤때는 분명 원하는 사이즈에 맞게 1개의 band만 나오게 짭니다.
밴드가 2개가 잡혔다면 엉뚱한 gene을 잡았을 확률이 높습니다.
아래에 앨피스님께서 말 ... |
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답변 2 | 2004.09.04 |
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| Q. cleaved caspase3 band관련 질문입니다~ |
| staurosporin을 치면 1band만 나오고 cytochormc를 처리하면 2band가 나오던데 이런거랑 비슷한건가요?
3. 마지막으로 저 두 band를 가지고 정량을하려면 두 band의 intensity값을 합쳐서 보통 계산하나요?
감사합니다~ ... |
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답변 0 | 2015.01.03 |
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| Q. 단백질 정제에 있어서 mutation이 주는 영향? |
| mutation 시키니 기존의 band 위에 band가 하나 더 생기면서 2band 처럼 변했네요.
혹시 예상되는 문제점이나 해결방법이 있으면 답변 부탁 드립니다 ... |
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답변 0 | 2017.03.01 |
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| Q. cloning고수님들 자꾸 expression시 2 band가 나옵니다.ㅠ,,ㅠ |
| 안녕하세요 석사 새내기 입니다.ㅠ,,ㅠ
cloning을 하여 bacteria에 induction을 하고 SDS-PAGE를 내리는데
자꾸 2 band가 나오네요 ㅠ,,ㅠ(target size는 70kDa, 불필요한 band size는 55kDa)
coomasie blue로 염색을 해도 western ... |
| A. 가능성은
1. another strat site
2. premature termination
3. internal cleave of expressed protein
모두 가능성이 있는 얘기들이며 한번씩은 경험해 본 일이 있습니다.
1의 경우, 중간에 rbs (ribosome binding sequence 보통은 AAGGAG ... |
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답변 4 | 2014.02.03 |
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| Q. Flag, Myc vector cloning expression 시 double band가 나옵니다 |
| 하였는데요.
a-flag , a-myc으로 western blot을 하면 계속해서 2band가 나옵니다.
siza가 크게 차이나는 것도 아니고 바로 위 아래로 딱 붙어서 나오는데
그 이유를 모르겠네요.. insert안에 stop codon이 중복해서 ... |
| A. 흔한 현상이며, 보통 posttranslational modification에 의해 multiband가 나타나는 경우가 많습니다. |
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답변 1 | 2013.06.06 |
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| Q. western-blot 시 | 첨부파일 |
| 를 찾고자 하는 실험을 하고있는데요
원래 mdm2가 2band를 가지는 것으로 알고 있었는데
잡밴드들이 갑자기 늘어나기 시작하더니
이젠 막 3~4개 이상의 밴드가 detection되고있습니다
sample의 ... |
| A. cleavage product를 잡았다고 의심되시면
항체 회사와 의논해보시는 것이 가장 효율적입니다. |
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답변 2 | 2009.01.30 |
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| Q. 단백질 정제 후 2밴드 발생 | 첨부파일 |
| 안녕하세요 서울에 있는 대학원생입니다.
단백질 정제를 하고 있는데요
e.coli로 발현되는 단백질을 sonication이후에 ni nta 컬럼으로 정제하는 중
이상하게 컬럼에 들어갔다가 나오면1밴드였던 단백질이 ... |
| A. 해당 단백질 monomer와 dimer 사이즈를 확인해보세요..
한 일년더되서 기억은 잘 안나는데 저도 그런경험이.. |
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답변 2 | 2017.01.20 |
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