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실험Q&A    286건 정확도순 날짜순
Q. 환자 조직에서 RT-PCR했을때 b2-microglobulin 양이 다릅니다.  |  첨부파일 첨부파일
다른 환자 조직에서 RNA뽑아서 RT-PCR했는데 control인 b2-microglobulin양이 다르게 나왔습니다. 제가 실험을 잘못한걸까요? 그렇다면 b2-microblobulin양이 똑같이 나오도록 cDNA양을 조절해서 다른 유전자도 같은 ...
A.  synthesis를 들어갈때 들어가는 RNA 양 그리고 PCR에 들어가는 cDNA양은 모두 동일하게 들어가야 합니다. 그렇게 하셨는데도 이런 결과가 있다면 다른 control을 한 번 써보시지요... 이론적으로는 house keeping ...
답변 1  |  2009.08.18
Q. 마우스 조직에서 RT-PCR, qRT-PCR primer design 질문하려고 합니다.
qRT-PCR 하려고 합니다. 조직에 감염된 기생충의 detection을 하고 싶어서 PCR 하려고 하는데요. ... 모르겠어서요. 그리고, 조직에서의 RT-PCR이 나을까요? 아니면 그냥 DNA만 추출해서 qPCR로 하는게 나을까요? ...
A.  마우스에 조직에서 기생충이 감염된 것을 확인하기 위해서는 그 조직이 마우스가 맞는 것인지, 또 ... 시퀀스가 필요합니다. RT-PCR, qPCR은 둘 중 원하시는 대로 실험하시면 됩니다. RT-PCR은 밴드를 직접 ...
답변 1  |  2020.04.08
Q. 조직과 cell에서 RT-PCR 할때 band가 차이나는 이유
제가 조직에서 RNA를 뽑아서 cDNA합성하고 RT-PCR을 해서 target gene를 본경우와 cell에서 똑같이 RNA를 뽑아서 RT-PCR을 하고 똑같은 target gene을 보았는데 조직에서 뽑은것은 원래 알고있는 사이즈에 밴드가 ...
A.  가지 가능성을 생각해 봅니다. 1. 조직과 cell 간의 발현 차이로 인해, 다시 말해 cell에서 ... splicing에 의해 다른 형태의 isoform이 존재할 가능성. 3. 조직 특이적 발현 양상이 강해 조직 수준에서는 ...
답변 1  |  2016.10.13
Q. FFPE 조직 PCR에 대해서요
FFPE 조직이 슬라이드 글라스에 고정되있어서 그걸 긁어서 ... ㅠ 이게 잘된거인지 의심되고 그 DNA를 통해서 PCR하는데 밴드가 뜨질않네요 도움좀 주세요 ...
A.  상의 조직의 면적이 작다면 여러 장에서 긁으시기를 권합니다. 1cm2 ... 자일렌 및 워싱 처리를 하시는 방법은 워싱하는 작업 중에 조직을 조금씩 잃어버리게 됩니다. 따라서 슬라이드를 자일렌에 ...
답변 1  |  2015.07.15
Q. tumor 조직에서 RT- PCR
다른 일반 tissue나 cell에서는 RT-PCR은 많이 진행해봤는 데 ... 전부 조금 사용합니다 제가 PCR data 나온 것을 confirm 하던 중 같은 tumor 조직인 데 패턴이 정 반대로 나와 원래 cDNA sythesis해놓은 것을 다시 pcr을 ...
A.   저희가 RT-PCR 뿐만 아니라 IF,WB도 진행해야하기때문에 sample을 ... 해야 결과에 변동이 없는지 궁금합니다. 역시 조직을 사진 찍어놓고 부위별로 표시를 해 두는 방향으로 진행해야할까요 ...
답변 2  |  2016.05.10
Q. 제가 ICR mouse에서 kidney, liver, skin을 각각 collect해서 RT-PCR을 하고있는데요.
liver, skin을 각각 collect해서 RT-PCR을 하고있는데요. 예를 들어서 ... sequence의 MnSOD primer를 써도 PCR이 되는데, skin 조직에서는 control로 사용하는 18S 말고는 product가 나오질 않아서요 ㅠ_ㅠ kidney, liver, skin ...
답변 0  |  2009.07.06
Q. 조직으로 real-time PCR하시는분들께
너무 큰 문제에 봉착해서요..ㅠㅠ 제가 지금 하는 조직은 human breast tissue입니다. Trizol로 RNA를 뽑는데 lipid가 많이 뜨고요.. cDNA를 얻어서 real-time PCR을 하는데 기계가 actin이나 GAPDH를 detecting하지 못합니다. ...
A.  actin이나 GAPDH가 mouse에서만 잡히는 primer가 아니신지요..?
답변 1  |  2007.03.28
Q. DAPI 염색 후 PCR?
DAPI로 염색하고 DNA를 추출해서 PCR을 하려고 합니다. DNA추출은 ... 하려 합니다. DAPI로 염색된 조직PCR 하는데 문제가 없을까요? Proteinase K가 DAPI를 아마 분해하고 dilution 되서 괜찮지 않을까 예상하고 ...
A.  DAPI가 PCR을 저해한다는 보고가 거의 안보이는 걸로 봐서는 PCR이 가능 할 수도 있겠습니다. DNA 추출 후 chloroform 정제를 하여 DAPI 제거 후 PCR 하는 것도 좋을 듯 합니다. 그리고 단백질 분해 효소인 Proteinase ...
답변 2  |  2018.11.06
Q. mouse 조직에서 RNA 추출할때
mouse 간, 지방, 근육에서 RNA 추출해서 RT-PCR을 하려고 합니다. 그런데 여러가지 문제가 좀 ... 어떻게 하시나요? 2. RNAlater 처리해서 얼려논 조직을 한번 녹여서 반쯤 사용하고 다시 얼려놨는데요 이거 ...
A.   그래서 northern을 해보면 다른 조직에서는 한가지 band가 나오지만 그런 조직에서는 두개의 band가 ... 많이 생길겁니다. 그러나 RT-PCR정도는 별 문제없는것 같습니다 ...
답변 1  |  2009.08.10
Q. PCR band가 멀티밴드가 뜹니다.  |  첨부파일 첨부파일
NCBI에서 많이 발현하는 조직부분을 찾아서 해당 조직의 gradient PCR을 진행해 64C정도에서 one band를 확인하였고, 이후 실험할 조직에 다시 진행해보니 multiband가 뜨네요.. Gradient PCR을 진행해보기도 하고 ...
A.  primer에 의한 결과가 썩 좋지는 않더라구요. 그리고 그냥 RT PCR돌려서 band 확인 말고, real-time RT PCR로 melting curve를 확인해보셨는지요 melting curve가 몇개가 뜨는지, 어느 위치에 뜨는지에 따라서 실제 ...
답변 7  |  2019.02.15
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7500 | 한국생명공학연구원 | 2007.05.08
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