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실험Q&A    4,107건 정확도순 날짜순
Q. PCR 조건좀 잡아주세요  |  첨부파일 첨부파일
ㅠㅠ 오히려 스미어링하게 나와 밴드가 안뜨네요. 어떻게 조건을 변경해야만,, 원밴드로 뜰수 있을까요. 제발 도와주세요 ...
A.  실험한 PCR product를 1/40-1/50희석 후 1ul만 따서 다시 같은 조건으로 PCR을 해보세요. 경우에 따라서는 MgCl2를 약간 첨가해 주기도 하고요. Cycle수는 30만 줘보시고요. 그래도 밴드가 안뜨면 primer를 다시 ...
답변 2  |  2013.07.03
Q. 배양 공기 조건 ??
배양 공기 조건 중 공기 중 산소 조건과 저 산소 조건에 대해 어떤 식으로 설명을 해야 합니까? 부탁드려요..^^
A.  보통 저산소조건이라고 말로만 하지는 않습니다. 배양기내의 산소분압을재서 O2 몇%, CO2 몇%, N2 몇% 라고 표시해줍니다.
답변 1  |  2008.01.18
Q. PCR 조건에 대해 질문드립니다..ㅠ
. 두 번 다시해봐도 안뜨더라구요..ㅠ 혹시 뭐 바꿔야 할 조건이 있는지.. 고수분들의 조언 부탁드립니다.. ...
A.  저도 Takara taq주로 사용하는데 타카라사에서 hot start가능한 taq이 있나요?;; 만약에 있다면 pre-denaturation단계에서 98도 5분정도로...annealing도 한 15~20초사이로 해보심이 좋을거 같네요. 좋은 연구성과 있길 ...
답변 2  |  2011.01.31
Q. 플라스미드 대량 추출을 위한 대장균 배양조건
Vector와 Insert가 대량으로 존재하면 Blunt end ligation에 더 좋은 조건이겠죠? 만날 수 있는 확률을 올려주니까요... 기초적인 지식 공부에 도움되는 서적도 알려주시면 감사하겠습니다 ...
A.  blunt-end ligation은 DNA 양이 많은 것과는 상관 없습니다. ligation은 DNA가 일정 농도 범위에서 가능하며 DNA 농도가 너무 높아지면 길게 연결되는, 소위 concatemer가 형성됩니다. large size DNA marker를 만드는데 사 ...
답변 2  |  2015.11.18
Q. PCR 조건잡기가 어려워서 ~ 도와주세요
볼수 없는데요 무엇이 잘못된것일까요 ?? PCR이 잘 나오던 조건에 이렇게 안나올수 있는 건가요? 도와주세요 ㅜ ...
A.  제 경우에는....pcr 기기가 바뀌어도 잘 안될때 있더라구요! 저도 첨엔 어처구니가 없더라구요... 하지만,,정말 그랬어요. 그리고 희미 하게 라도 밴드가 잡히면... 그 밴드를 elution 해서 re-pcr 이라도 해 ...
답변 3  |  2011.04.18
Q. PCR 조건 조정 좀 부탁드립니다.  |  첨부파일 첨부파일
┐ 55 20sec │- 40 cycle 72 20sec ┘ 72 10min 4 forever 입니다. 실험 조건이 특이하여 tube에서 하는 것이 아니라 glass에서 하는데 열 전달 효율이 좀 떨어지는 것 같습니다. PCR 고수님들의 조언 부탁드립니다 ...
A.  밝은 밴드가 여러 개 뜨는 것은 primer를 잘못 짠거 같습니다.
답변 4  |  2013.01.08
Q. 조건에 따른 실험의 RNA추출 시 주의할점..?
RNA가 순간적으로 발현되서 실험에 영향을 줄 수 있나요? 조건이 바뀌었을 때 RNA 발현이 얼마나 빨리 일어나는지 혹시 아시는 분 계신가요 ...
A.  빛실험은 아니지만서도,, 제가 약물을 처리하고 RNA level을 time course로 볼땐 cell type마다 다르기는 하지만, 빠른 세포는 2~4시간정도에서 RNA level이 변화 했었습니다. 잠깐의 노출로 RNA level이 몇분만에 확 ...
답변 1  |  2015.10.07
Q. PCR 조건
PCR 조건을 잡는데...100bp 밑으로 dimer들이 잡히는데....그럼 조건을 다시 잡아야 되나요? 원하는 band에 영향이 있나요?
A.  목적 band가 잘나온다면 primer농도를 약간 줄이시면 됩니다. 나머지 조건은 동일하게 하시구요..
답변 3  |  2008.11.05
Q. HPLC 분석 조건을 LC-MS에 적용
피크가 아예 나오지 않네요.. MS는 동정하기 위한건데.. HPLC조건이라.. LC에 적용하려면.. 압력을 더 높여야하나요? 압력을 어떻게 높이죠? 온도나 유속을 달리해야하나요? 아님, 컬럼자체도 바꿔야 ...
A.  피크가 나온다면 컬럼이 문제겠죠. 그렇지 않다면 이온화 조건을 다시 잡아야 할 것입니다.(유속, 전압, 온도, 가스 등등) 짧은 소견이었습니다 ...
답변 2  |  2013.05.21
Q. PCR조건
target band가 깨끗하게 단일밴드 나왔어요 그래서 같은 조건으로 30cycle 돌린후 젤런하니 웬걸 잡밴드가 5줄이나 보이구요 타겟밴드는 무지 약하게 나와요. 이런경우는 어찌 해석해야할까요 ...
A.  짧은 template에 의해 증폭이 더 잘 이루어집니다. 13 cycle 조건에서는 나오지 않았던 잡밴드가 그 이상의 cycle에서 생겨나게 되면, 그리고 그 길이가 원래 님이 원하시는 사이즈보다 작으면 그 template에 ...
답변 2  |  2009.09.25
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