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'효소/Enzyme' 관련 검색광고입니다.
Cloning관련 Enzyme의 명가 NEB (New England Bio labs) 한국총판 필코리아입니다. 저렴하고 빠른 배송으로 보답해드리겠습니다. 전국 어디서나 주문하세요. T:02-2105-7020, F:02-2105-7025, mail: info@philekorea.co.kr
실험Q&A    1,279건 정확도순 날짜순
Q. 제한효소
보니 로스가 생기는 거 같아 한꺼번에 같이 잘랐어요. 다른 제한효소 자를때 차례로 먼저 잘라 일루션 그다음 효소 잘라 일루션 하지 않고 한꺼번에 버퍼활성 같은 것 선택해 함깨 잘라도 되는지요? ...
A.  간단히 말해 가능하고 또한 많이 하는 방법입니다. 판매회사의 카탈로그를 잘 들여다 보면 이런 방식에 대한 자세한 정보가 많이 있는 것을 아실 수 있을 겁니다.
답변 1  |  2006.10.09
Q. 제한효소 관련 질문.
안짤린다기 보다는 덜짤린 것들이 대부분인데 이럴 경우 제한효소를 더 추가하나요 아니면 시간을 더 증가 시켜서 진행하시나요 ? ...
A.   이라고 하셨는데 제한효소를 구입해서 보면 1ul당 10-20 units 의 양입니다. 1 unit란 람다 DNA 1ug을 1시간동안 자르는 효소의 양입니다. 효소 site의 수에 따라서 다르겠지만 1unit는 보통 연구원들이 자르는 ...
답변 4  |  2017.02.24
Q. 제한효소 vector single digestion 확인법
제한효소를 이용하여 4.7kb vector를 single digestion해서 ligation을 하려고 하는데요.. vector가 잘렸는지는 어떻게 알 수 있을까요? 다른 plasmid에 있는 insert를 자를때는 single 하면 plasmid와 insert 2개의 band가 ...
A.  plasmid와 insert 2개의 band가 나오잖아요 이 부분을 보니 아직 plasmid를 완벽히 이해하고 계시지 않은 것 같군요. 같은 DNA일지라도 plasmid와 linear form의 DNA는 전기영동시 다른 크기의 band를 보여줍니다. single ...
답변 1  |  2011.05.22
Q. 제한효소 컷사이트 포함한 프라이머 작성시에 더미 붙이기
그리고 덧붙여 제가 자르려는 amplicon 양말단 외에도 내부에 제한효소 자리가 하나 더 있을때 partial digestion 으로 가운데가 안잘린 잘삭체를 얻을 수 있는지도 궁금 합니다. 어떤 특별한 다른 방법이 ...
A.  시간조절과 온도 조절을 통해 가능하긴 하지만 그 노력이 도를 넘어야만 성공하실 수 있을 겁니다. 중간에 없는 다른 enzyme을 찾아보세요. 경우에 따라서는 sticky end의 서열은 같고 enzyme 서열은 다른 ...
답변 1  |  2009.03.28
Q. 제한효소 더블컷 대신 싱글 컷으로 처리하는 방법
밴드확인하고 에탄올 침전 시킨 후에 두 번째 제한효소 처리 밴드 확인 후에 gel elution 하고 라이게이션하면 되는 건가요? 질문 2. 전기영동시에 A버퍼로 더블컷 한 밴드가 계속적으로 휩니다. 같이 ...
A.  싱글 다이제션을 하는 방법은 첫번째, 제한효소 처리 후, 그냥 Direct Purification 해주시고, 다시 다이제션 과정을 수행하시면 됩니다. 두번째 과정 후에는 gel extraction을 하시면 되구요. 에탄올 침전은 ...
답변 1  |  2010.07.04
Q. 제한효소 관련 질문입니다
Dam methylation 관련 효소인 Dpn1 을 이용하여 실험을 하는 중 입니다. 일단 prep한 DNA를 Dpn1 으로 잘라서 gel을 걸어보면 원래의 size는 없어지는 것이 확인이 됩니다. 그런데 real-time pcr을 해보면 24h 보다 48h ...
A.  나올 수 있습니다. 정확한 수치를 표시한 데이타는 없지만 제한효소는 수명이 그리 길지 않습니다. 하루이틀 장시간 처리해야 하는 경우라면, 한번 넣어주고 계속 처리하는 것보다는 일정간격으로 ...
답변 4  |  2011.03.04
Q. 제한효소로 자른후 전기영동 했을때 밴드 갯수
EcoR1으로 plasmid를 잘라서 전기영동하면 insert 양쪽 끝부분이 잘려서 밴드가 두개가 나와야 하는데 3개가 나오는 경우는 왜 그런건가요?? 친구가 한쪽만 잘려서 그렇다는데 한쪽만 잘리면 linear한 형태로 ...
A.  원하시는 두 개의 band + one cut band
답변 2  |  2011.12.02
Q. 제한효소 절단  |  첨부파일 첨부파일
제한효소로 pKD13을 절단하는 실험을 했습니다. 사용된 제한효소는 각각 PstI(1,2조) , XbaI(3,4조) 인데요 (동 ... 게 각 제한효소의 인식자리가 2개이기 때문인가요? 두개 제한효소를 사진을 통해 비교도 ...
A.  보이는것은 자르는 자리가 두개씩이가 때문입니다. 각 제한효소가 자르는 두개의 위치가 다르면 밴드 패턴은 다르게 나옵니다 ...
답변 1  |  2013.04.27
Q. 두개의 제한효소처리후 확인??
처리하지 않은 것(plasmid dna)은 밴드가 3개가 보이구요, 제한효소로 처리 (제한효소 2개)한것은 밴드가 하나가 보이는데요.. 이 결과가 벡터가 linear되었다고 생각할수 있을까요 ...
A.  plasmid DNA는 그자체로서는 circular이고 supercoiled form이기 때문에 원래의 크기로 전기영동되지 않습니다. 하지만 enzyme으로 잘라 linear하게 만들면 원래의 size로 전기영동이 됩니다. 이를 통해 효소가 제대 ...
답변 1  |  2012.11.16
Q. 제한효소반응후 밴드 결과가 예상결과와 다를 수있나요?  |  첨부파일 첨부파일
봤을때 희미한 밴드라도 보이면 충분히 반응이 안되거나 제한효소가 모자랐거나라고 생각을 하겠는데 그러한 밴드도 없이 매우 선명하게 두개의 밴드가 떴습니다. 참고로 Hinf효소는 GANTC 이고 Rsa I ...
답변 0  |  2014.05.08
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