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실험Q&A    72건 정확도순 날짜순
Q. 황산암모늄 침전 단백질 얼렸다 녹였을때 생기는 침전물은..
,,, 2. 얼렸다 녹이면 황산암모늄 가루(맞을거예요 황산암모늄가루,,,)랑 침전액이 다시 생기거든요,, 이걸 센돌이 돌려서 상등액만 취해야 하는건지,, 아니면 볼텍스 해서 용액에 녹게 해야 하는건지요, ...
A.  Salt를 사용하여 단백질을 침전시킨 다음은 항상 투석을 하여 desalting을 해 주어야 합니다. 님의 현상은 당연한 것으로(1, 2번 현상 모두) 투석하면 침전물이 소량 생기며 그 침전물은 구조적으로 변성 ...
답변 1  |  2008.10.22
Q. 황산암모늄 단백질침전 질문입니다
녹기만하면 되나요? 아님 몇시간정도 녹여야하나요? 3. 황산암모늄 30, 50, 70% 침전해서 이를 원심분리한 것을 다시 버퍼에 녹여 활성 test해보면 되나요? 4. 염석 후 투석을 해야 된다는데 위의 침전물을 ...
A.   50% 되게 녹인 뒤 원심분리된 supernatant -> 70% 되게 황산암모늄 추가 -> 원심분리 -> pellet 분리 -> dialysis (desalting) ->sample 농축 -> 활성 test 에 사용 (70% fraction) 4. 말씀하신 대로 투석막에 넣고 버퍼에서 ...
답변 2  |  2011.11.25
Q. 황산암모늄 이용 단백질 염석에 대해
그런데 4,5번 과정에서 원심 분리하고나면 falcontube내에 황산암모늄 결정으로 추정되는 것들(원심분리 전에는 다 녹았던)이 상당량 생겨 침전되어 있는데, 이거를 그대로 두고 buffer첨가해 vortexing 해주면 ...
A.  그런데 4,5번 과정에서 원심 분리하고나면 falcontube내에 황산암모늄 결정으로 추정되는 것들(원심분리 전에는 다 녹았던)이 상당량 생겨 침전되어 있는데, 이거를 그대로 두고 buffer첨가해 vortexing 해주면 ...
답변 1  |  2010.09.08
Q. 황산암모늄을 이용한 단백질 정제 관련 질문입니다.
직접 한 번 실험을 해봤는데, 297g/l정도까지 되도록 황산암모늄 용액 400g/l를 넣어봤는데 solution에 큰 변화가 없었습니다... centrifuge를 해도 가라앉는게 없었구요.. protein이 침전된다고 하면 갑자기 확 ...
A.  70%라면 saturated concenration입니다. 모든 %농도는 최종 부피를 기준으로 계산을 합니다. 즉 70g이 최종 부피 100ml에 녹아야 합니다. Stirring을 하며 하루정도 상온에서 녹여주고, 녹지않은 것을 가라앉힌후 ...
답변 1  |  2009.05.11
Q. 미생물 배양 상등액에서 황산암모늄 이용 단백질 정제시에,,
상등액을 따라버리는 과정에서 침전물(단백질도 있고 황산암모늄 결정같이 생긴것도 있어보임)도 같이 딸려 내려가기도 하는데 원래 그런 것인가요?? 4. 그리고 falcon tube 침전물에 buffer를 넣고 ...
A.  안용근 교수님이 집필하신 효소 단백질 정제법 이라는 책을 보시면 염석에 대해 잘 나와있으니 참고하시기 바래요. 염석시 주의 사항은 대충 아시는것같은데 결정형을 바로 넣으시면 녹는데 시간이 ...
답변 1  |  2010.09.06
Q. 황산암모늄 수용액에 침전물 생성의 원인이 궁금합니다
황산암모늄 수용액+ 순수(Demi Water)를 섞은상태에서 첨부사진처럼 유기물 덩어리? 같은것들이 계속 생기는데 원인이 궁금합니다. 화학 전공자가아니라 지식이 없어서 구글링에서도 답을 못찾아 이렇게 ...
A.  황산암모늄 농도가 높아 결정화되는게 아닌가 싶습니다. D.I. water 비율을 높이면 녹아 없어집니다
답변 1  |  2019.05.08
Q. salting out 에서 황산암모늄의 농도질문
실험에서 황산암모늄 30%,50%,70%로 단백질 침전을 시켰는데요 이렇게 3개로 나눠서 침전한 이유가 뭔가요?? 그리고 70%이상으로 안하는 이유는 뭔가요??
A.  대상으로 염석된 효소의 농도를 측정한 결과가 있는데 황산암모늄 70% 이상에서는 거의 100% 효소가 염석되어 나왔다고 보고되어 있습니다. *** 단백질 정제 관련 실험을 시작하신다면, 그리고, 영어에 ...
답변 1  |  2009.04.02
Q. 암모늄이온이 녹아 있는 용액의 멸균방법이 궁금합니다.
하고있어서 액체 멸균방법을 찾고 있습니다. 수용액에는 암모늄이온, 인산 매트릭스를 사용하고 있습니다. 감도가 고정될 수 있는 방법이 있을까요 ...
A.  박테리아 오염 가능성이 있다면 농도는 모르겠지만 0.2um 필터로 여과를 해보세요.
답변 1  |  2020.03.13
Q. 염화암모늄 g 당 TAN 농도
염화암모늄을 몇g 녹였을 때 측정되는 TAN 값에 대한 식을 알고 싶습니다. 예를 들어 TAN 10ppm을 만들어야하면 염화암모늄 몇 g을 넣어야하는지를 알고싶습니다.
답변 0  |  2020.05.25
Q. 황산암모늄으로 단백질 침전시킨 후 sds-page하려합니다.
단백질 침전시킨 후 sds-page하려합니다. 지금 황산암모늄70% 넣어서 원심분리 후 침전 된 단백질(?) 을 모아두었습니다. 이제 dialysis 해야하는데 시간상 2일 후에 할 수있을것 같습니다. ...
A.  case by case입니다. 70% salting out시킨 ppt에도 salt가 상당히 남아있기 때문에 dialysis를 바로 해주는 것을 권장합니다.
답변 1  |  2009.10.15
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