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BioLab 이은열 교수
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 전체 > Microbiology > Yeast
질문 pcr 관련 질문드립니다
알ssonsson(대학원생)  |  06.24 20:46

4.5kb band pcr을 진행중인데 band가 전혀 뜨지 않습니다.

pcr 조건은

pre-denaturation 95도 2분

denaturation 95도 30초

annealing 은 primer tm 보다 10도정도 낮게 30초 

retention time 5분

총 30cycle진행했습니다.

pcr을 총 8번 정도 진행하면서, annealing tm, taq pol, dNTP, buffer도 바꿔가면서 진행했고, genomic DNA도 새로 뽑아서 진행해봤습니다.

어디서 가장 큰 문제가 있었을까요?

그리고 추가적으로 primer 농도가 높게 들어가면 결과가 잘 안나올 수 있나요? 

#pcr
#dna
#primer
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