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 전체 > Molecular Biology-Protein > Pull-down Assays
질문 DNase 활성 및 이용가능 buffer 문의
알돈먹는꼬마(대학원생)  |  2021.11.13

안녕하세요. 이번에 biotinyltaed DNA (vector/ pcr product)를 이용해 biotinylated DNA를 streptavidin으로 pull-down 후 해당 dna에 binding한 protein을 Western blot으로 검증하는 실험을 수행중에 있습니다.

https://academic.oup.com/nar/article/47/19/10235/5565289

위 링크 논문의 method를 참고하여 진행하고 있는데 sample boiling 직전에 DNase를 처리하는 step이 존재합니다.

 

그런데 DNase를 어떤 buffer 조성에서 처리를 하여야할지 모르겠어서 질문을 드립니다.

 

NP40또는 RIPA 등의 elution buffer에서 DNase 이용이 가능한지 혹은 DW나 다른 버퍼에서 dnase 처리 후 sample buffer로 boiling해야할지 의견이 궁금합니다.

 

감사합니다.

#IP
#ChIP
#pull-down
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