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 전체 > Cell Biology > Transfection
질문 293cell에 대해서 질문이 있습니다.
알무루(대학원생)  |  04.09 13:00

293cell 로 tranfection실험을 하고 있습니다.

PEI로 DNA를 tranfection하거나 LTX&PLUS로 siRNA를 tranfeciton하는데 cell이 예전보다 많이 뜹니다.

Tranfeciton optimized medium (TOM) media를 사용하는데 DMEM과 media change를 할 때 많이 떠버립니다.벽면을 따라서 살살 넣어주고 있는데 예전보다 더 살살 넣는거같은데  6well에 3분의1정도가 뜨는거같습니다.

cell이 계대배양을 많이 해서 안좋아져서 그런건지 예전에 만들어둔 stock을 풀고 있는데 현미경으로 봤을 때 cell의 상태가 안좋아 보이다 하루 지나면 오염이 되어 있더라구요. stock은 지금 4개정도 푼거같습니다...

stock은 액체질소에서 꺼내서 37도 water bath에 뒀다가 녹으면 5분 spindown시켜 10%FBS DMEM에 풉니다.

제가 하는 tranfection과정에서 의심되는 문제점이나 stock을 풀 때의 문제점이 있을까요ㅠㅠ

#HEK293
#transfection
#stock
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