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질문 제한효소 처리 후 밴드 3개 질문드립니다!
뒷다리해징(대학원생)  |  03.31 18:22
첨부파일 파일첨부: DDD.jpg (61 KB)
이미지 첨부파일

안녕하세요. 클로닝 처음 해보는 석사생입니다.

실험실에 선배가 없어 브릭 도움을 많이 받아서 클로닝을 진행중입니다!

저는 발현벡터 pET23d(3.66kb)에 insert(4.65kb)를 넣어서 확인하는 과정에 있습니다.

forward에는 Not1, Reverse에는 EcoR1을 넣어서 프라이머를 짰고

먼저 EcoR1 처리를 해서 밴드를 확인한 후 사이즈에 맞는 밴드를 확인했습니다.

그 후 gel extraction 후 Not1 처리후 밴드를 확인했습니다.

겔 상에서 2,3 번 레인은 사이즈에 맞게 잘린 거 같다는 생각이 들었는데 4번 레인은 밴드가 3개로 보여서 왜 그런건지 도대체 모르겠어서 질문 드립니다.

Q1. 2,3번 레인은 사이즈에 맞게 잘린게 맞을까요? 저 중 하나로 sequencing 진행해도 괜찮겠죠??

Q2. 4번 레인에서 밴드가 3개인 이유가 다 안 잘려서 3개 일까요?

너무 단순한 질문이라면 죄송합니다 ㅠ 처음해보는 거라서 친절하게 답변해주시면 감사하겠습니다!! 감사합니다~

#DNA
#클로닝
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