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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
질문 웨스턴 샘플 로딩 시 팁을 얻고 싶습니다.
개구리n_jyoung92@naver.com(대학원생)  |  02.27 19:16
웨스턴 샘플 로딩을 하는데요. 1.5 두께 15개 lane을 이용하고 있고 25ul를 로딩합니다. 로딩할 수 있는 맥시멈 볼륨이 25ul로 나와있기도 하고 넘치는 것 같지 않아서 유지하고 있습니다. 그런데 천천히 피펫팅을 하고 마지막에 피펫을 한번 더 누르는 과정에서 샘플 로쓰가 일어나는 것 같습니다. 마지막에 한번 더 누르는 과정을 하지 않았을 때가 오히려 웰에 더 담겨(?)있는 느낌입니다.로딩하는 양을 줄이는 게 당연한 해결책이겠지만 가지고 있는 샘플의 단백질량과 원하는 단백질량 등을 계산하여 여의치가 않습니다..

그리고 로딩팁(?)이 따로 존재하는 지 잘 모르지만 저희는 없기에 일반 팁을 사용하면 로딩하려고 버퍼에 진입할 때 피펫을 누르지 않았음에도 조금이지만 샘플이 버퍼에 녹아들더라구요.

동량의 단백질을 로딩해야 하는게 가장 중요한데 육안으로 봐도 로딩이 들쭉날쭉된 것이 보여서 조언을 통해 스킬을 얻고 싶습니다.
#웨스턴
#샘플
#로딩
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