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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
질문 genomic DNA의 Tm 값 구하는데 도와주세요ㅠ
알이지지지짛(과기인)  |  2019.12.12

논문을 찾아보다 보니 

genomic DNA의 Tm 값을

real time PCR로 melt curve를 이용해서 구하더라구요

논문에 나온대로 70도에서 15초 이후  70도에서 98도로 초당 0.1도 증가 

로 세팅하여 pcr 수행했습니다. 

논문에서는 SYBR green 1 을 4000X 혹은 10000X로 사용하라고 했는데

실험실에는 SYBR green master mix만 있어서 이걸 사용했습니다. 

예상으로는 각 샘플당 meling curve가 깨끗하게 나오고 Tm값을 구할수 있을거라고 생각했는데, multi peak가 존재하여 Tm 값을 구할수가 없었습니다. 

 

genomic DNA 의 Tm 값을 구할때 어떻게 하셨는지 궁금합니다. 

 

#Tm
#DNA
#real time PCR
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