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질문 RAW cell의 배양 배지와 Activation에 대해 질문드립니다!!
알apple693(대학생)  |  2019.08.18

동아대학교에서 RAW cell에 대해 공부 중인 학부생입니다.

RAW cell에 대해 몇 가지 궁금증이 생겨 질문을 올립니다.

 

1. 현재 배지를 RPMI로 키우고 있습니다. 하지만 많은 논문을 참고해보니 DMEM   으로 배양하는 경우가 더 많았습니다.  DMEM으로 배양할 시 부착능력 혹은 LPS에 대한 Activation이 더 잘 증가하는 건가요??

2. NO assay를 하기위해 LPS(1ug/ml)의 농도로 처리하여 24h 후에 griess시약을 이용하여 실험을 진행하였으나 비처리군에 비하여 높은 NO 증가값을 보이지 않았으며 Activation조차 잘 되지 않았습니다. 이런 경우에는 LPS의 농도를 증가시켜 assay해보는 것이 좋은 방안인가요???

3. 제가 COX-2 Western blot에 대한 논문들을 참고하여 LPS(1ug, 5ug/ml) 처리군과 LPS 비처리군을 실험한 결과 COX-2의 발현량이 LPS 처리농도가 증가할수록 감소되는 경향을 띄었습니다. 제 생각으로는 저의 테크닉 부족으로 인한 결과라고 생각되오나 혹시 원인이 있을지 궁금합니다!

 

+LPS는 sigma사의 LPS from E.coli 0111:B4 제품을 PBS에 1mg/ml의 스톡상태로 녹여 사용했습니다.

#RAW cell
#LPS
#Activation
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