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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
질문 ponceasu 염색 후 membrane이 이상해요..
알dwre(대학원생)  |  2019.08.17
첨부파일 파일첨부: 1.jpg (400 KB)
이미지 첨부파일

제목 그대로입니다 ㅠㅠ

총 6개 샘플 내린건데... marker 바로 옆 샘플 두개가 위에서 저렇게 번지는듯한 모양을 보여요

나머지 그렇지 않은 샘플들은 b-actin 포함해서 다 band detection이 되는데

저렇게 번지는 듯한 모양을 보이는 샘플들은 band가 아예 안뜨더라구요....

 

단백질 정량은 BSA 희석액 이용해서 standard curve로 계산했습니다.

R2값은 0.99이상이었구요..

단백질 양은 다 같이 30 ug loading했습니다. (같은 target protein을 측정한 선행연구에서 30~40 ug을 로딩했길래 저도 30 ug을 로딩했습니다.)

13% gel 만들어서 사용했고 50 V 30분, 120V 1시간 전기영동했습니다.

transfer는 wet 방식으로 80V 2시간 PVDF membrane으로 진행했습니다.

답변 주시면 감사하겠습니다..

#Western blot
#ponceasu
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