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질문 ChIP 실험을 위한 조직 Fixation 시 Over-fixation 가능성에 대해
개구리Marine(대학원생)  |  2019.01.31

ChIP 실험을 위해 조직을 고정 한 뒤, 이 후 Chromatin shearing 과정을 실험중에 있습니다.


1. 보통 조직을 고정 할 때, 4% formaldehyde 와 같은 고정액에 조직을 10분 정도 처리 한 뒤,
2. Glycine 이 포함된 Stop solution 을 10분정도 처리 후 조직 고정단계를 멈추어 주고,
3. 그다음 Washing 한 뒤 다음단계로 들어가게 되는데요.


이 때 2. 단계에서, 4% Fromaldehyde, + Stop solution (Glycine) 이 포함된 상태에서 원래는 5~10분 처리 이지만, 약 2~3시간 조직을 오래 보관하게 되었습니다.  


이렇게 진행 할 경우 너무 Over fixation 되어서 다음 단계에 영향을 미칠 수 있을까요?
아니면, Stop solution 을 처리 한 상태이므로 Fixation 은 더 진행되지 않는 것 일까요?


관련 경험이 있으신분께 고견을 구합니다!

#Fixation
#ChIP
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