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질문 지방세포분화
알배워요요(과기인)  |  03.05 09:48

현재 3T3-L1 (ATCC)으로 분화실험을 하고 있습니다.
구글에 돌아다니는 프로토콜대로 실험을 진행하는데 문제가 있어 여쭤봅니다.

보통 14일 분화실험을 진행하라고 되어 있습니다.
MDI 2d, Ins2d, FBS포함배지로 쭉~~

몇번을 하다보니 분화율이 저조하여 고수님께 여쭤봅니다.

논문참고시 대부분의 논문에서 시딩할때 2일후 100% 컨플루언스하게 시딩하라고 해서
그렇게 진행하고 있는데
문제는 분화율이 너무 낮다는 것입니다.
예비실험할때는 100디시에다가 80정도 컨플루언스할때 시작했는데 비교적 잘 되었습니다.

하지만 이를 6well plate에 위와 같이 100% 컨플루언스하게 해야 잘된다고 하여
3x10^5 cells/ml로 (토탈 6x10^5 cells/well)로 진행하였습니다.
이정도 깔면 2일정도 후면 꽉차게 됩니다.
4~6일정도 키우면 군데군데 떡지게 자랍니다.

여기서 질문.
논문에 따라 실험자에 따라 다르긴하겠지만 6well 기준 시딩할때
웰당 셀수가 어떻게 되시는지요?

#3T3-L1
 
#지방분화
 
#MDI
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