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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 HaCaT 계대배양 시 잘문있습니다!
올챙이ysa(대학생)  |  02.19 09:33

안녕하세요 현재 HaCaT으로 여러 실험을 진행하고있습니다.

HaCaT이 80%이상 자라서 계대배양을 진행하려고 Cell scrapper를 이용해서 cell을 떨어트리

는데 실타래?처럼 길게 나오고 계대배양하면 cell이 잘부착되지않습니다.

다른분들 보니까 cell scrapper말구 B16F10처럼 Trypsin EDTA를 사용하던데 어떤게 맞는건

지 답글 부탁드립니다!

#동물세포
 
#HaCaT
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

셀 스크래핑을 하는 이유가 따로 있으신지요?
저는 T/E를 처리해서 셀을 수거하고 있습니다.

금개구리안재진  |  02.19 09:41  

안재진님

저도 인수인계 받은건데 계속 세포가 부착이안되서 질문남겼습니다ㅠㅠ

방금 1X Trypsin EDTA 3ml분주하고 3분정도 반응시켰는데 세포가 안떨어지더라구요ㅠㅠ

뭐가 문제인지 알려주실 수 있나요?

올챙이ysa  |  02.19 11:02  


HaCat cell은 잘 안떨어지는 셀입니다.

저는 1X PBS washing, 0.5X T/E washing, 1X T/E incubation (5~10분 정도-현미경 관찰), cell 수거

이런 단계로 진행합니다.

금개구리안재진  |  02.19 11:36  

HaCaT이 잘안떨어져요.. 제경우 2ml 로 8~10분정도 반응시킨후에 때거든요? 3분이면 다른cell들은 잘떨어지는데 HaCaT의경우는 좀더 잘붙는cell이라 쪼금만더반응시켜주시면잘 때지고 잘자랄거같아요

올챙이구구갸갸  |  02.19 12:15  

그럼 cell이 안붙고 죽는이유가 cell scraper를 사용해서 그럴 수 있나요??

올챙이ysa  |  02.19 14:03  

트립신 1ml  처리 후 37도씨에서 5분 정도 반응하세요~

DIGE  |  02.22 15:22   

https://open.kakao.com/o/gAQXtAhb

피부세포.피부관련실험 정보공유톡방인데 오셔서같이정보공유해요!

올챙이구구갸갸  |  03.10 19:22  

안녕하세요! 혹시 HaCaT cell분양받을수있을까요? 구입하고싶습니다!

noeun2339@snu.ac.kr로 메일부탁드립니다.

Roeun  |  06.10 14:57   
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