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오은규
오은규 (Eunkeu Oh) 저자 이메일 보기
US Naval Research Laboratory
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Quantum-Dot-Conjugated SARS-CoV-2 Spike Pseudo-Virions Enable Tracking of Angiotensin Converting Enzyme 2 Binding and Endocytosis
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Abstract

The first step of SARS-CoV-2 infection is binding of the spike protein’s receptor binding domain to the host cell’s ACE2 receptor on the plasma membrane. Here, we have generated a versatile imaging probe using recombinant Spike receptor binding domain conjugated to fluorescent quantum dots (QDs). This probe is capable of engaging in energy transfer quenching with ACE2-conjugated gold nanoparticles to enable monitoring of the binding event in solution. Neutralizing antibodies and recombinant human ACE2 blocked quenching, demonstrating a specific binding interaction. In cells transfected with ACE2-GFP, we observed immediate binding of the probe on the cell surface followed by endocytosis. Neutralizing antibodies and ACE2-Fc fully prevented binding and endocytosis with low nanomolar potency. Importantly, we will be able to use this QD nanoparticle probe to identify and validate inhibitors of the SARS-CoV-2 Spike and ACE2 receptor binding in human cells. This work enables facile, rapid, and high-throughput cell-based screening of inhibitors for coronavirus Spike-mediated cell recognition and entry.

KEYWORDS:quantum dot, SARS-CoV-2, spike, receptor binding domain, angiotensin converting enzyme 2, fluorescence, endocytosis

논문정보
- 형식: Research article
- 게재일: 2020년 08월 (BRIC 등록일 2020-09-07)
- 연구진: 국외연구진
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김현민
발표: 김현민 (KAIST)
일자: 2020년 9월 29일 (화) 오후 02시 (한국시간)
언어: 한국어
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