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 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning
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질문 ligation 16도씨에서의 시간
올챙이(과기인)  |  02.14 11:44

ligation을 16도에서 진행하고 있는데 overnight 대신에 4-5시간 동안만 진행해도 되나요? ㅠㅠㅠ

#cloning
 
#ligation
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

네.. 가능합니다.

대왕개구리SPEED  |  02.14 11:55  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

시간을 줄이려면 상온에서 1시간도 괜찮습니다.

NEB T4 ligase 프로토콜을 보면 16도 O/N 이지만 상온은 10~20분 내외 입니다. (스티키엔드일때).

특별히 Blunt end 가 아니라면 그리 길지 않게 해도 잘 반응합니다.

금개구리안재진  |  02.14 12:47  

혹시 그러면 16도에서 거의 20시간을 놔둬도 되나요? ㅠㅠ

올챙이  |  02.14 14:09  

네..가능합니다.

ligation은 짧은 시간 해도 됩니다.

23도 30분~1시간, 16도 3시간~5시간 정도 만으로 충분합니다.

대왕개구리SPEED  |  02.14 15:02  
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