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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 hemoglobin assay kit protocol 과련 기초 질문입니다..
올챙이317011(대학원생)  |  02.13 15:08

cell에 hemin 처리를 하고 헤모글로빈 키트를 이용해서 분석하는 실험을 하려고하는데..

계쏙 실패해서 질문 올리게 되었습니다 ..


1. 깨끗한 바닥 96 웰 플레이트의 웰에 50 μL의 물 (blank)과 50 μL의 캘리브레이터를 넣으십시오. Blank와 Calibrator에 물 200 μL를 넣으십시오. 희석 된 캘리브레이터는 100 mg / dL 헤모글로빈과 동일합니다.
 
2. 50 μL의 샘플을 우물로 옮긴다. 샘플 웰에 시약 200 μL를 가볍게 가볍게 혼합하여 섞으십시오.

3. 실온에서 5 분을 품어 낸다.

4. 400 nm에서 흡광도를 측정합니다 (A400).


위에 방법에 따라 실험을 진행하는데,

1.번의 과정전에 cell에 hemin을 0.5mM처리후 3일 배양한 뒤 프로토콜에 따라 50ul을 넣어 준비하는게 맞는지.. 아니면 카운팅 후 특정 cell 수 만큼을 따와야 하는지가 궁금하고

또 혹시나위의 실험을 해보시거나 아시는 부분이 있따면 노하우 등을 알 수 있을까요..
기초적인거 같지만 해본적이없어서 실험이 계속 딜레이되어 난감합니다..

#hemoglobin
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