실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
-
lenti
(비회원)
-
19.01.16 01:56
Q1. 말씀하시는 1:5는 medium volume 비율이 아니라 (새로이 옮길 세포 숫자:옮기기 전 전체 세포 숫자)의 비율이 아닌가요? 즉 전체의 1/5만큼만 새로운 flask에 옮겨주면 되므로
5ml 넣어 1ml를 옮기고 medium+9ml 해서 10ml를 맞추던
1ml넣어 0.2ml를 옮긴뒤 medium+9.8ml해서 10ml 맞추던
이전에서 전체의 1/5만큼의 세포를 옮겨준 셈이 됩니다.
Q2, 같은 양의 세포(전체의 1/5)를 75T에 비해 2배 넓은 곳(150mm dish)에 깔면
당연히 깔리는 세포밀도(농도)가 75T에 깔 때보단 1/2로 줄겠죠.
T flask의 숫자는 플라스크의 면적을 말합니다.
25T는 25cm2 75T는 75cm2 정도 입니다.
그러나 150파이는 면적이 아닙니다. 세포배양용으로 150mm가 있는지 모르겠지만
덮는 뚜껑기준으로 150mm 정도가 되니 세포가 자라는 면적은 약 120~130cm2 정도가 되겠네요
-
레벨4
cell쎌쎌
-
19.01.16 16:42
subculture 시 1:5 로 하라는 내용을 보신 것 같은데 1:5는 그냥 이상적인 숫자 입니다.
세포에 따라 추천하는 dilution 비율이 정해져는 있겠지만,
subculture 전 세포의 confluency, survival rate, 다음 subculture 예정날짜 등에 따라 조절 가능합니다.
pellet이 평소보다 적거나.. 실험 스케줄로 다음 subculture를 빨리 해야하는 경우에는 1:2로 할수도 있다는 것이지용
cell에 시약 처리나 transfection 등을 위해서 정확한 세포수가 필요한 경우에는 cell counting을 하시면 되고,
그냥 subculture 하실때는 건강하게 세포를 키우는게 목적이므로,
너무 꽉차게 키우지 않도록만 유지해주시면 되어요!!