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[InvivoGen] Inflammasome
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Inflammasomes
NLR (Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor) family 단백질은 선천 면역 반응 조절에 관여합니다. 이러한 단백질은 DAMPs (Damage-associated molecular patterns)라고 알려져 있는 host derived signal 뿐만 아니라, 세포질에서 PAMPs (Pathogen-associated molecular patterns)를 감지합니다.
특정 NLR은 inflammasome으로 불리는 large caspase-1 활성화 복합체 (large caspase-1-activating complexes)의 생성을 유도합니다. Autoproteolytic maturation을 통한 caspase-1의 활성화는 염증성 사이토카인 interleukin-1β (IL-1β)와 IL-18의 분비로 이어집니다. 지금까지 4종류의 inflammasome이 NLR 단백질에 의해 확인되고 정의되었습니다. 4종류의 inflammasome은 아래와 같습니다.
1. NLRP1/ NALP1b inflammasome ], 2. NLRC4/ IPAF inflammasome 3. NLRP3/NALP3 inflammasome , 4. AIM2 (absent in melanoma 2) containing inflammasome
*아래 그림을 클릭하여 Inflammasome 동영상 세미나를 다운 받으실 수 있습니다.
IL-1β AND IL-18
IL-1β와 IL-18는 감염, 염증 및 자가 면역 과정 등 다양한 생물학적 영향을 일으키는 cytokine입니다. IL-1β는 발열, 림프구의 활성화, 백혈구 침윤 (leukocyte infiltration)을 촉진하여 감염 및 손상에 대한 전신, 국소 반응에 관여합니다.
IL-18는 IFN-γ 생산을 유도하고 T-helper 1 (Th1) 세포의 polarization에 관여합니다.
Caspase-1에 의해 cleavage되는 IL-1β와 IL-18의 maturation 은 면역 반응을 유도하기 위한 필수 조건입니다. Caspase-1은 비활성 45kDa zymogen (pro-caspase-1)으로 합성되며 적절한 자극에 의해 autocatalytic 과정을 거치게 됩니다. 활성화된 형태의 효소는 subunits p20과 p10을 포함합니다. NLR과 caspase-1을 연결하는 bipartite adapter protein인 ASC (apoptosis-associated speck-like protein containing a carboxy-terminal CARD)의 상호 작용을 통해 Caspase-1은 inflammasome multiprotein complex 내에서 활성화됩니다.
NLRP1 INFLAMMASOME
NLRP1은 caspase-1, caspase-5, ASC 및 triphosphate ribonucleotide로 multimolecular complex 인 inflammsome를 구성합니다.
NLRP1은 NLRP1의 pyrin (PYD) domain을 통해 ASC에 직접 결합하며, NLRP1의 CARD domain을 통해 caspase-1에 직접 결합합니다. NLRP1 inflammasome의 활성은 muramyl dipeptide (MDP) 및 anthrax lethal toxin (mouse NLRP1b)에 의해 유도됩니다. 연구결과에 따르면 in vitro에서 MDP와 anthrax lethal toxin의 감지하기 위해서는 NOD2가 필요한 것으로 보여졌습니다.
NLRC4 INFLAMMASOME
NLRC4 (IPAF)는 NLRC family에서 유일한 inflammasome 구성원으로 알려져 있습니다. NLRC4는 adaptor protein 없이 NLRC4의 CARD domain 와 pro-caspase-1이 결합하고, 강력한 IL-1β 분비를 위해서는 ASC와의 상호 작용이 필요합니다.
NLRC4의 oligomerization은 Salmonella typhimurium, Legionella pneumophila, Shigella flexneri 및 Pseudomonas aeruginosa 와 같은 다양한 박테리아의 cytosolic flagellin 혹은 박테리아 분비 시스템 (type III와 type IV)에 의해 전달될 수 있는 다른 자극에 의해 촉진됩니다.
NLR 계열의 또 다른 구성원인 NAIP5는 특정 상황에서 ligand의 감지에 관여하는 것으로 보입니다.
Flagellin은 TLR5와 NLRC4 inflammasome를 모두를 촉진시키는 흥미로운 ligand 입니다. 따라서 flagellin는 cytokine의 생성을 독립적으로 신호하고, caspase-1을 통해 maturation을 할 수 있게 합니다.
NLRP3 INFLAMMASOME
NLRP3 inflammasome은 inflammasome 중에서 가장 많이 연구되었습니다.
대식세포에서의 NLRP3 inflammasome의 활성화는 세포가 ATP에 노출된 조건에서, liposaccharide, peptidoglycan, 및 bacterial nucleic acids 같은 다수의 PAMP를 통해 일어날 수 있습니다 실제로, ATP가없는 경우 LPS로 자극 된 대식세포는 많은 양의 pro-IL-1β를 생성하지만, mature cytokine은 거의 방출하지 않습니다. ATP 와 nigericin, maitotoxin과 같은 특정 박테리아 독소는 세포 내 이온 성분의 변화를 일으켜 NLRP3 inflammasome의 활성화를 유도합니다. ATP의 효과는 pannexin과 함께 purinergic P2X7 수용체에 의해 매개되며, 활성화 될 때 cytosol에서 칼륨이 빠르게 유출됩니다.
Inflammasome related prudcts
IL-1β/IL-18 Sensor Cells
Product | Description | Qty | Cat no. |
HEK-Blue™ IL-1β Cells | HEK 293 reporter cells for human and murine IL-1β cytokines | 3-7 x 10e6 cells | hkb-il1b |
HEK-Blue™ IL-18 cells | Human & Mouse IL-18 Reporter Cells | 3-7 x 10e6 cells | hkb-hmil18 |
HEK-Blue™ IL-1R cells | HEK 293 reporter cells for human and murine IL-1α & IL-1β cytokines | 3-7 x 10e6 cells | hkb-il1r |
Inflammasome Test Cells
Product | Description | Qty | Cat no. |
KO/KD/OE cells | |||
THP1-KO-NLRP3 cells | NLRP3 Knockout in THP-1 cells (human monocytes) | 3-7 x 10e6 cells | thp-konlrp3z |
THP1-defNLRP3 cells | NLRP3 Knockdown in THP-1 cells (human monocytes) | 3-7 x 10e6 cells | thp-dnlp |
THP1-KO-ASC cells | ASC Knockout in THP-1 cells (human monocytes) | 3-7 x 10e6 cells | thp-koascz |
THP1-defASC cells | ASC Knockdown in THP-1 cells (human monocytes) | 3-7 x 10e6 cells | thp-koascz |
THP1-KO-CASP4 cells | CASP4 Knockout in THP-1 cells (human monocytes) | 3-7 x 10e6 cells | thp-kocasp4z |
THP1-KO-GSDMD cells | GSDMD Knockout in THP-1 cells (human monocytes) | 3-7 x 10e6 cells | thp-kogsdmdz |
RAW-ASC KO-GSDMD cells | GSDMD Knockout & ASC expressing RAW 264.7 cells (murine macrophages) | 3-7 x 10e6 cells | raw-kogsdmd |
RAW-ASC KO-CASP11 cells | Caspase-11 Knockout & ASC expressing RAW 264.7 cells (murine macrophages) | 3-7 x 10e6 cells | raw-kocasp11 |
THP1-defCASP1 cells | Human THP-1 Monocytes - caspase-1 deficient | 3-7 x 10e6 cells | thp-dcasp1 |
THP1-NLRC4 Cells | NLRC4 inflammasome test cell line | 3-7 x 10e6 cells | thp-nlrc4 |
Reporter cells | |||
THP1-ASC-GFP cells | Human THP-1 Monocytes - ASC speck reporter cells | 3-7 x 10e6 cells | thp-ascgfp |
THP1-HMGB1-Lucia™ Cells | Pyroptosis and necroptosis reporter monocytes | 3-7 x 10e6 cells | thp-gb1lc |
Parental cells | |||
THP1-Null Cells | Positive control cell line for inflammasome studies | 3-7 x 10e6 cells | thp-null |
THP1-Null2 Cells | Positive control cell line for inflammasome studies | 3-7 x 10e6 cells | thp-nullz |
RAW-ASC cells | ASC expressing RAW 264.7 cells (murine macrophages) | 3-7 x 10e6 cells | raw-asc |
NLRC4 Reporter Assay
Product | Description | Qty | Cat no. |
THP1-NLRC4 Cells | NLRC4 inflammasome test cell line | 3-7 x 10e6 cells | thp-nlrc4 |
HEK-Blue™ KD-TLR5 cells | TLR5 deficient - IL1-β SEAP reporter HEK293 cells | 3-7 x 10e6 cells | hkb-kdtlr5 |
Inflammasome Inhibitors
Product | Description | Qty | Cat no. |
NLRP3 inflammasome inhibitor | |||
MCC950 | NLRP3 inflammasome inhibitor | 10 mg | inh-mcc |
Glybenclamide | NLRP3 inflammasome inhibitor - Proton pump inhibitor | 1 g | tlrl-gly |
Caspase inhibitors | |||
Ac-YVAD-cmk | Caspase-1 inhibitor | 5 mg | inh-yvad |
VX-765 | Caspase-1 and Caspase-4 inhibitor | 10 mg | inh-vx765i-1 |
50 mg | inh-vx765i-5 | ||
Z-VAD-FMK | Caspase inhibitor | 1 mg | tlrl-vad |
Multi-target inhibitors | |||
BAY 11-7082 | IκB-α inhibitor - NLRP3 inflammasome inhibitor | 10 mg | tlrl-b82 |
Isoliquiritigenin | IκB-α inhibitor - NLRP3 inflammasome inhibitor | 10 mg | inh-ilg |
Parthenolide | Caspase-1 and inflammasome inhibitor | 50 mg | inh-ptd |
Inflammasome Genes
Product | Description | Qty | Cat no. |
pUNO1-hASCa | pUNO1 bearing the human ASC gene, isoform 1 (long) | 20 µg | puno1-hasca |
pUNO1-hASC-DN | pUNO1 bearing a dominant negative version of the human ASC gene | 20 µg | puno1-hasc-dn |
pUNO1-mASC | pUNO1 bearing the mouse ASC gene | 20 µg | puno1-masc |
pUNO1-mASC-DN | pUNO1 bearing a dominant negative version of the mouse ASC gene | 20 µg | puno1-masc-dn |
pSELECT-hASC-GFP | hASC::GFP fusion gene | 20 µg | psetz-hascgfp |
pSELECT-mASC-GFP | mASC::GFP fusion gene | 20 µg | psetz-mascgfp |
pUNO1-hCASP1a | pUNO1 bearing the human CASP1 gene, isoform alpha | 20 µg | puno1-hcasp1 |
pUNO1-mCASP1 | pUNO1 bearing the mouse CASP1 gene | 20 µg | puno1-mcasp1 |
pUNO1-hGSDMA | pUNO1 bearing the human GSDMA gene | 20 µg | puno1-hgsdma |
pUNO1-mGSDMA | pUNO1 bearing the mouse GSDMA gene | 20 µg | puno1-mgsdma |
pUNO1-hGSDMBc | pUNO1 bearing the human GSDMB gene, isoform 3 (GenBank) / 4 (UniProt) | 20 µg | puno1-hgsdmb |
pUNO1-hGSDMC | pUNO1 bearing the human GSDMC gene | 20 µg | puno1-hgsdmc |
pUNO1-hGSDMD | pUNO1 bearing the human GSDMD gene | 20 µg | puno1-hgsdmd |
pUNO1-hGSDMD-Flag3x | pUNO1 bearing the human GSDMD::Flag3x gene | 20 µg | |
pUNO1-mGSDMD | pUNO1 bearing the mouse GSDMD gene | 20 µg | puno1-mgsdmd |
pUNO1-hGSDMEa | pUNO1 bearing the human GSDME gene, isoform 1 | 20 µg | puno1-hgsdme |
pUNO1-mGSDME | pUNO1 bearing the mouse GSDME gene | 20 µg | puno1-mgsdme |
pUNO1-mPJVK | pUNO1 bearing the mouse GSDMF (PJVK) gene | 20 µg | puno1-mgsdmf |
pUNO1-hHMGB1 | pUNO1 bearing the human HMGB1 gene | 20 µg | puno1-hhmgb1 |
pUNO1-hHMGB1(s) | pUNO1 bearing a modified (secretable) human HMGB1 gene | 20 µg | puno1-hhmgb1-s |
pUNO1-mHMGB1 | pUNO1 bearing the mouse HMGB1 gene | 20 µg | puno1-mhmgb1 |
pSELECT-hHMGB1-Lucia | hHMGB1::Lucia fusion gene | 20 µg | psetz-hhmgbluc |
pSELECT-mHMGB1-Lucia | mHMGB1::Lucia fusion gene | 20 µg | psetz-mhmgbluc |
pUNO1-hCARD12 | pUNO1 bearing the human NLRC4 (CARD12) gene | 20 µg | puno1-hcard12 |
pUNO1-hNALP3a |
pUNO1 bearing the human NALP3 (NLRC3) gene, isoform 1
|
20 µg | puno1-hnalp3 |
pUNO1-mNALP3 | pUNO1 bearing the mouse NALP3 (NLRP3) gene | 20 µg | puno1-mnalp3 |
pUNO1-mNALP3-HA3x | pUNO1 bearing the mouse NALP3-HA (NLRP3-HA) gene | 20 µg | puno1ha-mnalp3 |
Inflammasome Inducers
Product | Description | Qty | Cat no. |
Canonical Inflammasome Inducers - NLRP3 Inflammasome | |||
Alum | Aluminium hydroxide; NLRP3 inflammasome inducer | 500 µl | tlrl-aloh |
ATP | Adenosine 5'-triphosphate disodium salt | 1 g | tlrl-atpl |
CPPD Crystals | Calcium pyrophosphate dihydrate crystals | 5 mg | tlrl-cppd |
Hemozoin | Synthetic heme crystal | 5 mg | tlrl-hz |
MSU Crystals | Monosodium Urate Crystals | 5 mg | tlrl-msu |
25 mg | tlrl-msu-25 | ||
Nano-SiO2 | SiO2 nanoparticles; NLRP3 inflammasome inducer | 20 mg (2 x 10 mg) | tlrl-sio-2 |
Nigericin | Nigericin, sodium salt | 10 mg | tlrl-nig |
50 mg | tlrl-nig-5 | ||
TDB | Mincle Agonist - Synthetic analog of the cord factor | 2 mg | tlrl-tdb |
Canonical Inflammasome Inducers - AIM2 Inflammasome | |||
Poly(dA:dT) Naked | dsDNA naked | 200 µg | tlrl-patn |
1 mg | tlrl-patn-1 | ||
Poly(dA:dT)/LyoVec™ | dsDNA naked - complexed with transfection reagent | 100 µg | tlrl-patc |
Canonical Inflammasome Inducers - NLRC4 Inflammasome | |||
FLA-PA Ultrapure | TLR5 Agonist - Flagellin from P. aeruginosa | 50 µg | tlrl-pafla |
FLA-ST Ultrapure | Ultrapure flagellin from S. typhimurium | 50 µg | tlrl-epstfla-5 |
10 µg | tlrl-epstfla | ||
FLA-ST | Standard flagellin from S. typhimurium | 100 µg | tlrl-stfla |
Canonical Inflammasome Inducers - NLRP1 Inflammasome | |||
L18-MDP | MDP with a C18 fatty acid chain | 1 mg | tlrl-lmdp |
MDP | Muramyldipeptide (L-D isoform, active) | 5 mg | tlrl-mdp |
Non-canonical Inflammasome Inducers | |||
E. coli OMVs | Escherichia coli outer membrane vesicles (OMVs) | 100 µg | tlrl-omv-1 |
E. coli OMVs InvivoFit™ | InvivoFit™ Escherichia coli outer membrane vesicles (OMVs) | 500 µg | tlrl-omv |
Curdlan | Beta-1,3-glucan from Alcaligenes faecalis | 1 g | tlrl-curd |
HKCA | Heat-killed C. albicans | 10e9 cells | tlrl-hkca |
Pustulan | Dectin-1 Agonist - Beta-glucan from Lasallia pustulata | 100 mg | tlrl-pst |
Zymosan Depleted | Hot alkali treated zymosan | 10 mg | tlrl-zyd |
Inflammasome Primers
Product | Description | Qty | Cat no. |
LPS-EB | Standard LPS, E. coli 0111:B4 | 5 mg | tlrl-eblps |
LPS-EB Ultrapure | Ultrapure LPS, E. coli 0111:B4 | 5 x 10e6 EU | tlrl-3pelps |
Pam3CSK4 | Synthetic triacylated lipopeptide; TLR2/TLR1 agonist | 1 mg | tlrl-pms |
Poly(I:C) HMW | Long synthetic analog of dsRNA | 10 mg | tlrl-pic |
50 mg | tlrl-pic-5 |
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* 학술 문의 Tel. 031-728-3236 E-mail. technical@dawinbio.com
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