[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 커뮤니티
랩박스 - 형광 이미징의 모든 것
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 소리마당PLUS 학회룸쉐어 Sci카페 SciON(설문조사) BioHelp
흡입법이나 쥐어짜기보다 진일보한 핵치환 기술
회원작성글 geosoft
  (2006-04-09 21:37)
 공감1   조회4652  인쇄  주소복사  소셜네트워크로 공유하기


핵치환에 있어서 쥐어짜기 방법을 개발하였다는 일본의 쯔노다 유키오 교수에 관련된 논문을 검색하다보니, 새로운 핵치환 기술에 대한 내용이 있었습니다.

demecolcine이란 화학물질을 사용하는 방법입니다.

아래 몇개의 논문을 링크합니다. 이중에서 두개는 짜내기 기법을 개발했다는 쯔노다 교수가 교신저자로 되어있는 논문입니다.

재미난 논문들이니 한번 훑어보시기 바랍니다. 논문 안에 들어있는 사진과 그림들도 볼만 합니다.


1. Effect of enucleation procedures and maturation conditions on the development of nuclear-transferred rabbit oocytes receiving male fibroblast cells

XJ Yin, Y Kato, and Y Tsunoda

( http://www.reproduction-online.org/cgi/reprint/124/1/41.pdf )


2. Production of Cloned Pigs from Adult Somatic Cells by Chemically Assisted Removal of Maternal Chromosomes1

Xi Jun Yina, Tetsuya Tania, Isao Yonemurab, Masahiro Kawakamia, Kazunori Miyamotob, Rie Hasegawab, Yoko Katoa and Yukio Tsunodaa

( http://www.biolreprod.org/cgi/reprint/67/2/442.pdf )


3. Demecolcine-Induced Oocyte Enucleation for Somatic Cell Cloning: Coordination Between Cell-Cycle Egress, Kinetics of Cortical Cytoskeletal Interactions, and Second Polar Body Extrusion1

Elena Ibáñez3,a, David F. Albertinib and Eric W. Overström2,a,b

( http://www.biolreprod.org/cgi/reprint/68/4/1249.pdf )


4. Activated bovine cytoplasts prepared by demecolcine-induced enucleation support development of nuclear transfer embryos in vitro

D. Fischer Russell 1, E. Ibáñez 1, D.F. Albertini 2, E.W. Overström 1 2 *

( http://www3.interscience.wiley.com/cgi-bin/abstract/110561576/ABSTRACT )



2번 논문의 introduction 일부분을 인용합니다.

두번째 단락을 유의해 보시기 바랍니다.


introduction

Production of cloned mammals by nuclear transfer of somatic cells into eggs in which the chromosomes were removed at the second metaphase stage (MII) is now feasible [1]. The technology has been extended to apply to the genetic improvement of farm animals, rescue of endangered species, and production of transgenic animals for medical use and organ transplantation. The nuclear transfer technique is currently unreliable, however, because the production efficiency of normal offspring is low [2].

The removal of chromosomes from recipient eggs is one of the key factors affecting cloning efficiency. The chromosomes of mouse and rat eggs can be observed and removed under an inverted microscope, but the chromosomes of rabbit, sheep, goat, bovine, and pig eggs are difficult to observe without DNA staining. Thus, the chromosomes in these species are removed mainly by aspirating or pushing out a large volume of cytoplasm underlying the first polar body with or without Hoechst staining [2].

mouse나 rat의 난자에서 염색체는 도립현미경으로 관찰하면서 제거할 수 있다. 그러나 토끼, 양, 염소, 소, 돼지 등의 난자의 염색체는 DNA 염색을 하지 않으면 관찰하기 힘들다. 그래서 이런 종들의 염색체는 제1극체 부근에 있는 많은 양의 세포질을 흡입하거나 짜내는 방법으로 제거한다.

흡입법을 사용하거나 짜내기를 사용하거나 염색체는 상당한 양의 세포질과 함께 제거되어야 합니다.


저 위 그림에 보이는 바와 같이 demecolcine이란 화학약품을 사용하면 난자 안의 염색체가 밀집하여 제2극체로 배출이 됩니다. 이 제2극체는 보통 말하는 수정할 때의 제2극체(N)와는 달리 2N 짜리로서 난자 안의 염색체 쌍이 모두 포함된 것입니다. 그것만 똑 따내면 염색체가 제거되는 것이지요. 세포질의 손상을 극소화할 수 있다고 합니다.

그런 방식으로 염색체를 제거한 뒤 체세포를 넣고 전기융합을 합니다.

이 방식은 세포질의 손상을 극소화할 수 있다는 면에서 흡입법이나 쥐어짜기 방법보다 진일보한 것임은 틀림 없습니다. 이 방법으로 토끼 복제를 성공했다고 하는군요. 이 방법이 얼마나 효율적인지 확인하기 위해서는 더 많은 실험이 필요할 것 같습니다.



영장류에도 이런 방식의 핵치환을 해 본다면 재미있을 것 같군요. 이미 실험하고 있는 사람이 있을지도 모르겠습니다.

회원작성글 wangabong  (2006-04-09 21:55)
공감0  비공감0  
사실, 쥐어짜기든, 젓가락기술이던, 흡입법이던,
어떤 이론적 근거를 기반으로한 메커니즘을 밝히는 작업이 아닌, 경험칙에 기반한 테크닉(손기술)정도야, 연구가 진행될수록, 실험노하우가 쌓일수록, 계속 효율적인 방법들이 계발될 수밖에 없죠.

그리고 궁극적으로, 줄기세포를 이용한 임상적용, 산업화 레벨까지 가게 된다면, 그 단계에 이르러서까지, ''박을순표 젖가락 기술'' 을 보유한 기능공들 대거 투입해서 핵치환 열라 하고 있을거라는 우스운 상상도 하기 힘듭니다.

단순한 핵치환 손기술 하나만 특허로 걸어두고 있으면, 300조 국부를 창출해 대한민국 운명이 바뀔거라고 굳게 믿는 아일럽,서프라이즈 사람들은.. 참.. 보기가 딱해, 안구에 습기 차는군요.
회원작성글 mingl  (2006-04-09 22:20)
공감0  비공감0  
geos...// 꼭 실험에 성공하시길 진심으로 기원합니다. 얼마 정도 기다리면 논문을 볼 수 있을까요^^
회원작성글 geosoft  (2006-04-09 22:25)
공감0  비공감0  
ming /

무슨 뚱딴지 같은 소리를...

회원작성글 wangabong  (2006-04-09 22:28)
공감0  비공감0  
ming // 하하. 줄기세포 관련 논문 다 취소당하고, 앞으로도 저널에 오를 가능성 " 160억조분의 일'' 인 황우석씨보다는 빠를 것 같군요.

논문 한장 남지 않은 황우석씨의 ''줄기세포 관련 성과들'' 은 오직 황씨 지지자들 마음속에만 있는 거죠~~..

회원작성글 피카소  (2006-04-09 22:39)
공감0  비공감0  
geos//논문 찾아내는 내공에는 geos님 따라갈 분이 없군요. chemical enucleation이란 방법이 있었군요. 세포질 손실을 감소시킨다는 면에서상당히 효율적인 방법으로 생각되는군요. 그런데 이게 섀튼이 말한 영장류에서 방추체손상 때문에 복제가 안 된다는 논리를 극복할 수 있을련지 모르겠습니다. 이 방법으로 했을때 centrosomal protein 등이 어떤 양상으로 변화를 받는지... 혹시 섀튼이 또 이들에게도 손 뻗치는 것은 아니겠죠^^
회원작성글 피카소  (2006-04-09 22:40)
공감0  비공감0  
ming//꽃 구경은 잘 하셨는지요. 저는 오늘도 안에서 답답한 하루를 보냈는데... 벚꽃 다 지고나서 꽃구경 가게 될런지도...
회원작성글 mingl  (2006-04-09 23:12)
공감0  비공감0  
피카소// 예 잘했습니다. 사실은 사람 구경을 많이 했지요. 홍보물 전해드리느라고요^^
회원작성글 피카소  (2006-04-09 23:33)
공감0  비공감0  
ming//주말에는 가족과도 함께 해야되지 않나요? 집에서 쫓겨나지 않도록 조심하세요... 저도 요즘 가족에 너무 소홀해서 특히 소리마당에 글쓰느라 지장이 많더군요. 그래도 다음주는 같이 정동진으로 일출보러 가기로 했습니다. 아직 한 번도 가보지 않았는데 별 것 없다는 사람도 있고... 하지만 초행길이라 기대가 됩니다...
회원작성글 아르키메데스  (2006-04-10 02:06)
공감0  비공감0  
[물리] 다른 분들이 별로 중요하지 않은 일로 신경전을 벌이다가 게시판을 시끄럽게 만드는 동안 좋은 정보를 찾아 내셨군요. 고맙습니다.
회원작성글 swk21  (2006-04-10 11:12)
공감0  비공감0  
geos...// 좋은 정보 감사합니다. NT-1 논란이 종식되면 핵치환 기술에 관하여 논의를 한번 해보고 싶습니다. ^^
회원작성글 mingl  (2006-04-10 11:56)
공감0  비공감0  
geos...//인간 난자에서도 제2극체가 방출되면서 chromosome 이 완전히 제거 가능하다면 좋은 방법이 될 수도 있을 것 같습니다. 그런데 실제 배반포까지 간 비율이 기존 방법에 비해 우월하다고 보여지지 않는 것 같습니다만.. 인간 난자에서 시도해볼만한 가치는 충분하다고 보여지며 완전한 염색체 제거가 가능한지 또 기존 방법에 비해 난자 탈핵시에 어떤 장점이 있는지 검토해 보면 좋겠군요.
회원작성글 geosoft  (2006-04-10 12:39)
공감0  비공감0  
기존 방법에 비해 우선 젓가락 기술과 같은 고난도의 미세한 손놀림이 필요하지 않고 감 따내듯이 염색체를 쉽게 제거할 수 있다는 점이 있겠네요. 여기에 레이저 기술이 결합된다면 담배 많이 피워 손이 떨리는 사람도 능히 탈핵을 할 수 있을 것 같습니다.

다음으로 염색체만 똘똘뭉쳐 극체로 방출되므로 세포질 손상을 최소로 줄일 수 있겠습니다.

섀튼의 방추체 가설이 맞다면 특히 영장류에서 기존의 방법보다 좋은 결과를 보일 것을 기대해 볼 수 있겠습니다. 누군가가 영장류에서 실험을 하더라도 대뜸 사람 난자로 실험하는 것보다는 원숭이 난자부터 착실히 경험을 축적한 뒤에 사람 난자를 다루는 것이 좋겠습니다.

사람을 포함한 영장류에서 배반포 형성까지는 가지만 줄기세포주 수립 혹은 복제에 실패하는 이유가 방추체 결함이 주요 원인이 아니라 리프로그래밍 문제라면 리프로그래밍 방법을 개선하지 않는다면 이 방법으로도 뾰족한 개선을 보이지 않을 수도 있겠습니다. 동물 종마다 리프로그래밍이나 활성화 방법은 차이가 나는데, 현재 사람을 포함한 영장류 핵치환의 경우에는 소 난자에 적용하는 방법을 거의 그대로 따르고 있습니다. 영장류에 특화된 방법이 따로 개발되지는 않았습니다.

이 방법을 적용해 본 동물들은 대충 검색을 해 보아도 소, 쥐, 양, 돼지, 토끼 등등 다양한 포유류에 걸쳐 있습니다. 사람을 포함한 영장류에도 적용할 수 있을 것으로 예상됩니다.

여러 논문들을 대충 훑어보면 이 방법을 사용했을 때 기존의 방법과 비슷하거나 좀 더 좋은 결과를 보이는 것 같습니다.

그린메이트바이오텍
위로가기
커뮤니티 홈  |  커뮤니티FAQ  |  커뮤니티 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크