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[학술] 웨스턴블롯에서 duplicate, triplicate
카레라이스(비회원)
  (2019-08-17 08:43)
 

웨스턴블롯에서 데이타 신뢰성을 높히기 위해 duplicate, triplicate 한다는게 무슨 의미인가요?

1. 한 젤에 같은 샘플을 두세개 레인에 따로 로딩 후 블롯들의 평균을 본다는건지

2. 아니면 똑같은 샘플을 두세개의 다른 젤에 로딩해서 블롯한다는건지

3. 같은 멤브레인을 스트리핑/리프로빙 반복해서 두세개 결과 값을 평균 낸다는건지

잘 이해가 안 가서 창피하지만 질문 드립니다 ㅠㅠ



태그  #웨스턴
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  댓글 2  
네이버회원 작성글 de********(비회원)  (2019-08-17 13:48)
1
반복실험해서 일률적으로 같은 현상이 나오는지 확인하라는 겁니다. 그러니까 한번에 3번에 반복하라는게 아니고... 시료부터 결과까지 3번 반복해야 independently triplicate experiment 가 되는거겠지요. 이렇게 하면 최소한의 신뢰를 확보했다고 봅니다. 우리가 평균낼때 최소 3반복이라고 하잖아요. 이게 그런 의미인데 p-value 를 도출하기 위해 최소 3개의 값이 필요해서 그런건데... 최근에 이 p value가 실제로 맞아 떨어지냐는 논란이 있지요.. 최소 p-value가 0.001정도는 확보되어야 그나마 유의성이 있다고 보는 사람도 있습니다. 원래는 0.05 미만이면 인정해주겠지만 솔직히 0.05는 값들간에 눈으로 봐도 그렇게 크게 차이 없거든요...

여튼 사설이 길었는데. 독립적인 3번의 실험으로 도출된 값을 봐줘야 한다는 겁니다.
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회원작성글 가공차(과기인)  (2019-08-17 16:28)
2
Biological triplicates를 의미합니다. 새롭게 해당하는 cell에 다시 3번정도 시도했을때 reproducibility가 있다면 괜찮은거입니다. 결국 한번하고 3번했다고 말해도 확인할 방법은 없지만, 스스로 확신이 드는게 좋을거 같아요.
솔직히 이 분야 하는거 크게 억맘금의 부귀영화 누리자고 하는것도 아니고 자기자신에대한 확신만큼은 바탕으로 진행해야 의미있으니까요 ㅎ
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