[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 커뮤니티
웨비나 모집
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2
전체보기 소리마당PLUS new 학회룸쉐어 Sci카페 SciON(설문조사) BioHelp
조회 738  인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
[별별소리] WBC분리 피콜법 고수분들 해답좀 주세요 ㅠㅠ
회원작성글 elflsl
  (2019-02-11 10:30)

제가 PBMC를 분리하려고 피콜법으로 실험을 하고 있는데, 원심하고 나면 피콜층이 더럽게 나와요..
피브린이나 지방이 낀것처럼 나오고 RBC가 중간중간 껴있어서 PBMC층만 따도 washing하면 RBC가 섞여있네요..

도대체 왜 이렇게 나올까요?? 피콜층위에 혈액(PBS+heparin 혈액)올릴때도 섞이지 않게 잘 올렸고, 원심은 400g 30분 했습니다.. 
사진 첨부합니다. 둘다 공복에 채혈했고, 각각 다른 사람 혈액입니다. 지금까지 여러번 실험해본 결과 첫번째 사진이 가장 깨끗한 편이고 두번째사진이 가장 심한 경우였습니다. 

피콜법 잘 아시는분 좀 도와주세요 ㅠㅠ 

upload image
upload image



태그  #ficoll   #PBMC
신고하기
목록 글쓰기
  댓글 3  
....  (2019-02-11 10:56)
1
RBS가 깨져서 그런 것 같은데요. 제 경험 상으로는 fresh한 혈액, 채혈 직후 잘 흔들어서 heparinization이 잘 일어난 혈액일 수록 결과가 깨끗한 것 같습니다.
그런데, 피콜층이 포함되지 않은 중간 경계면의 층만 분리해야하는 건 아시죠? 경계면만 잘 파이페팅하시면 피콜층이 지저분한 건 결과에 영향을 주지 않을텐데요.
댓글리플
  
  신고하기
댓글리플
회원작성글 elflsl  (2019-02-11 12:57)
2
경계선까지도 지저분하게 RBC가 껴있어서 경계선만 따도 그러네요 ㅠㅠ
heparin tube의 유통기한이 지나서 그럴 수도 있겠네요. 조언 감사합니다.
  신고하기
....  (2019-02-13 11:41)
3
원심분리기에 accel, decel 낮춰서 천천히 올라가고 천천히 떨어지도록 하는 것도 중요했던것으로 기억해요 층분리가 정확하게 이루어 지지 않았다면 저것도 확인해 보심이...
댓글리플
  
  신고하기
 
4월1일부터 소리마당 댓글 참여가 회원+SNS연동으로 변동됩니다.
이슈 글타래 보기
 
여성과기인 지원정책 찬반
 
공정한 연구과제 심사·평가
 
대학원생 인건비 문제
소리마당(전체)  |  오피니언  |  진로  |  학술  |  별별소리
3524
박사 인건비(생활비) 이 정도면 괜찮은 건가요? [2]
egaww...
08.23
225
0
3523
문제가 된 논문은 철회돼야 한다. [8]
ㅇㅇㅇㅇㅇ
08.23
564
5
3522
PI재량이라고 논문에 이름 막 넣어주는 행위! [1]
회원작성글 오아시스...
08.23
298
0
3521
그냥 연구노트 깝시다 [7]
회원작성글 signific..
08.23
819
11
3520
이번 사태의 이중사고자들에게. [6]
회원작성글 Jekka
08.23
747
9
3519
조국교수는 비겁하다 [1]
피해자
08.23
474
5
3518
아, 논문쓰기 싫다 [2]
Draft
08.23
553
0
3517
조국 실드치는 분들 정말 바이오 현직종사자가 맞는지 의심이 듭니다 [19]
회원작성글 파사이트
08.23
1169
7
3516
기회가 있기는 한데요 [2]
구경꾼
08.23
321
0
3515
클리앙 뭐하는 사이트 인가요..? [5]
코코***...
08.22
623
3
3514
시키는 대로 [3]
회원작성글 bibimbio
08.22
388
5
3513
IF 0.064 SCIE 저널에 광분하는 이유 [15]
응?
08.22
1303
0
3512
교육감이라는 사람이 의학저널을 에세이로 부르네요. [2]
회원작성글 Good.L
08.22
533
4
3511
연구재단과 관련해서 궁금한 것이
회원작성글 재떨이
08.22
174
0
3510
의료계는 왜 신속하게 조국 후보자 딸의 논문을 입시부정으로 몰고가는가? [6]
지나가는의
08.22
917
0
3509
의학계열입장.. 논문에 대한 결론 [5]
개소리 작...
08.22
741
4
3508
쉴드치는 거 너무 썩어빠진 거 아닌가요 [16]
회원작성글 Puaphysi..
08.22
1062
6
3507
지적 사기 행각 [1]
회원작성글 Pleiades
08.22
299
13
3506
블라인드 처리 조치 합니다.
회원작성글 마크툽
08.22
234
3
3505
통합 몇년까지 보통하고 졸업하나요
ㅇㅇ
08.22
167
2
처음 이전  1 02 03 04 05 06 07 08 09 10  다음 끝
오송첨단의료산업진흥재단
소리세움
[설문]이공계 대학원생 처우 개선을 위한 설문조사
주관기관: 국가과학기술자문회의, 6개 전문연구정보센터
조사기간: ~9/8까지
참여자 700분께 커피 모바일쿠폰 제공
설문참여하기
소리마당 PLUS
포닥나라
지금 이 성적으로.... [2]
포닥 지원관련하여 질문있습니다. [5]
피펫잡는 언니들
대학원에 괜히 입학하나 싶네요
블라인드 처리 [2]
이 책 봤니?
[서평] 은여우 길들이기
[홍보] 올리버 색스, 『모든 것은 그 자리에』
이 논문 봤니?
[추천] α-Difluoromethylornithine reduces gastric carcinog...
PNAS
[요청] 발포정 제조에 대한 의견 부탁드립니다.
연구비 부정신고
대학원생119
위로가기
커뮤니티 홈  |  커뮤니티FAQ  |  커뮤니티 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS