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이승환
이승환 (Seung Hwan Lee) 저자 이메일 보기
한국생명공학연구원
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조회 577  인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
Enhancement of target specificity of CRISPR–Cas12a by using a chimeric DNA–RNA guide
열기 Authors and Affiliations

Abstract

The CRISPR–Cas9 system is widely used for target-specific genome engineering. CRISPR–Cas12a (Cpf1) is one of the CRISPR effectors that controls target genes by recognizing thymine-rich protospacer adjacent motif (PAM) sequences. Cas12a has a higher sensitivity to mismatches in the guide RNA than does Cas9; therefore, off-target sequence recognition and cleavage are lower. However, it tolerates mismatches in regions distant from the PAM sequence (TTTN or TTN) in the protospacer, and off-target cleavage issues may become more problematic when Cas12a activity is improved for therapeutic purposes. Therefore, we investigated off-target cleavage by Cas12a and modified the Cas12a (cr)RNA to address the off-target cleavage issue. We developed a CRISPR–Cas12a that can induce mutations in target DNA sequences in a highly specific and effective manner by partially substituting the (cr)RNA with DNA to change the energy potential of base pairing to the target DNA. A model to explain how chimeric (cr)RNA guided CRISPR–Cas12a and SpCas9 nickase effectively work in the intracellular genome is suggested. Chimeric guide-based CRISPR- Cas12a genome editing with reduced off-target cleavage, and the resultant, increased safety has potential for therapeutic applications in incurable diseases caused by genetic mutations.

논문정보
- 형식: Research article
- 게재일: 2020년 07월 (BRIC 등록일 2020-07-21)
- 연구진: 국내연구진태극기
- 분야: Biotechnology, Genetics, Genomics
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발표: 김현민 (KAIST)
일자: 2020년 9월 29일 (화) 오후 02시 (한국시간)
언어: 한국어
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  댓글 2
회원작성글 풍요건강사랑감사  (2020-07-24 16:44)
이 형님
여기서 또보네
못생겼지만 뇌가 아름다운 울 형님
계속 좋은 논문 많이 쓰시는 모습에
존경의 마음을 포심패스트볼로 깊숙히 꼿아 봅니다.

From. 형님의 센터라인
회원작성글 윌리디엠  (2020-07-24 16:54)
큰형님과 작은형님 여기 다 계시네요...
이렇게 논문쓰다가 쓰러지니까 다음부터는 30점짜리로 하나만 쓰세요^^

from. 큰형님의 작은형님의 센터라인
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