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웹진 Vol.23, No.3 (2021년 3월) 발간
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이병진
이병진 (Byungjin Lee) 저자 이메일 보기
충남대학교
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  CV updated 2020-07-15 14:22
 
조회 786  인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
Modular microfluidics enables kinetic insight from time-resolved cryo-EM
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Abstract

Mechanistic understanding of biochemical reactions requires structural and kinetic characterization of the underlying chemical processes. However, no single experimental technique can provide this information in a broadly applicable manner and thus structural studies of static macromolecules are often complemented by biophysical analysis. Moreover, the common strategy of utilizing mutants or crosslinking probes to stabilize intermediates is prone to trapping off-pathway artefacts and precludes determining the order of molecular events. Here we report a time-resolved sample preparation method for cryo-electron microscopy (trEM) using a modular microfluidic device, featuring a 3D-mixing unit and variable delay lines that enables automated, fast, and blot-free sample vitrification. This approach not only preserves high-resolution structural detail but also substantially improves sample integrity and protein distribution across the vitreous ice. We validate the method by visualising reaction intermediates of early RecA filament growth across three orders of magnitude on sub-second timescales. The trEM method reported here is versatile, reproducible, and readily adaptable to a broad spectrum of fundamental questions in biology.

논문정보
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2020년 후보
- 형식: Research article
- 게재일: 2020년 07월 (BRIC 등록일 2020-07-13)
- 연구진: 국내(교신)+국외 연구진태극기
- 분야: Nanobio
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이병진(충남대학교)  |  발표일자: 2020-12-29
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