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전용문
전용문 (Yongmoon Jeon) 저자 이메일 보기
한국과학기술연구원
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조회 927  인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
Direct observation of DNA target searching and cleavage by CRISPR-Cas12a
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Abstract
Cas12a (also called Cpf1) is a representative type V-A CRISPR effector RNA-guided DNA endonuclease, which provides an alternative to type II CRISPR-Cas9 for genome editing. Previous studies have revealed that Cas12a has unique features distinct from Cas9, but the detailed mechanisms of target searching and DNA cleavage by Cas12a are still unclear. Here, we directly observe this entire process by using single-molecule fluorescence assays to study Cas12a from Acidaminococcus sp. (AsCas12a). We determine that AsCas12a ribonucleoproteins search for their on-target site by a one-dimensional diffusion along elongated DNA molecules and induce cleavage in the two DNA strands in a well-defined order, beginning with the non-target strand. Furthermore, the protospacer-adjacent motif (PAM) for AsCas12a makes only a limited contribution of DNA unwinding during R-loop formation and shows a negligible role in the process of DNA cleavage, in contrast to the Cas9 PAM.

논문정보
- 형식: Research article
- 게재일: 2018년 07월 (BRIC 등록일 2018-07-18)
- 연구진: 국내연구진태극기
광유전학의 과거, 현재와 미래[Neuron]
김윤석
발표: 김윤석 (Stanford University)
일자: 2020년 7월 30일 (목) 오후 02시 (한국시간)
언어: 한국어
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  댓글 1
회원작성글 sunnyhappy  (2018-07-30 15:59)
얼굴도 잘생기고 논문도 잘쓰고....
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