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김진수
김진수 (Jin-Soo Kim) 저자 이메일 보기
서울대학교, 기초과학연구원(IBS), UST
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23 KB
 
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Rescue of high-specificity Cas9 variants using sgRNAs with matched 5’ nucleotides
열기 Authors and Affiliations

Abstract
We report that engineered Cas9 variants with improved specificity-eCas9-1.1 and Cas9-HF1-are often poorly active in human cells, when complexed with single guide RNAs (sgRNAs) with a mismatch at the 5’ terminus, relative to target DNA sequences. Because the nucleotide at the 5’ end of sgRNAs, expressed under the control of the commonly-used U6 promoter, is fixed to a guanine, these attenuated Cas9 variants are not useful at many target sites. By using sgRNAs with matched 5’ nucleotides, produced by linking them to a self-cleaving ribozyme, the editing activity of Cas9 variants can be rescued without sacrificing high specificity.

Keywords : CRISPR-Cas, Off-target effect, Engineered Cas9 variants, Hammerhead ribozyme-linked sgRNA
논문정보
- 형식: Research article
- 게재일: 2017년 11월 (BRIC 등록일 2017-11-23)
- 연구진: 국내연구진태극기
- 분야: Biotechnology, Genetics
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