[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 한국을 빛내는 사람들
라이카써머캠프
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 추천논문 상위피인용논문 인터뷰 그이후 한빛사통계
배상수
배상수 (Sangsu Bae) 저자 이메일 보기
서울대학교, 기초과학연구원, 현 한양대학교
저자CV 보기
189 KB
 
조회 1558  인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
Structural roles of guide RNAs in the nuclease activity of Cas9 endonuclease

Youngbin Lim1, So Young Bak2, Keewon Sung2, Euihwan Jeong2, Seung Hwan Lee3, Jin-Soo Kim2,3, Sangsu Bae2,3,† & Seong Keun Kim1,2

1
Department of Biophysics and Chemical Biology, Seoul National University, Seoul 151-747, Republic of Korea. 2 Department of Chemistry, Seoul National University, Seoul 151-747, Republic of Korea. 3 Center for Genome Engineering, Institute for Basic Science, Seoul 151-747, Republic of Korea. Present address: Department of Chemistry, Hanyang University, Seoul 133-791, Republic of Korea.

Correspondence to Sangsu Bae or Seong Keun Kim.

Abstract
The type II CRISPR-associated protein Cas9 recognizes and cleaves target DNA with the help of two guide RNAs (gRNAs; tracrRNA and crRNA). However, the detailed mechanisms and kinetics of these gRNAs in the Cas9 nuclease activity are unclear. Here, we investigate the structural roles of gRNAs in the CRISPR-Cas9 system by single-molecule spectroscopy and reveal a new conformation of inactive Cas9 that is thermodynamically more preferable than active apo-Cas9. We find that tracrRNA prevents Cas9 from changing into the inactive form and leads to the Cas9:gRNA complex. For the Cas9:gRNA complex, we identify sub-conformations of the RNA?DNA heteroduplex during R-loop expansion. Our single-molecule study indicates that the kinetics of the sub-conformations is controlled by the complementarity between crRNA and target DNA. We conclude that both tracrRNA and crRNA regulate the conformations and kinetics of the Cas9 complex, which are crucial in the DNA cleavage activity of the CRISPR-Cas9 system.

논문정보
TOP5
2016년 선정
- 형식: Research article
- 게재일: 2016년 11월 (BRIC 등록일 2016-11-04)
- 연구진: 국내연구진태극기
- 분야: Structural_Biology
관련 Webinar
임영빈(Stanford University)  |  발표일자: 2017-02-24
관련 보도자료
“크리스퍼 유전자 가위 이렇게 작동한다”...크리스퍼 작동 원리 분자 수준에서 관찰
국내 연구진이 최근 세계 생명과학계에 가장 ‘핫’한 기술로 꼽히는 ‘크리스퍼(CRISPR) 유전자 가위’ 기술의 화학적 원리를 분자 수준에서 밝혀내는 데 성공했다. 크리스퍼 유전자 가위 기술은 DNA 일부를 정교하게...
광유전학의 과거, 현재와 미래[Neuron]
김윤석
발표: 김윤석 (Stanford University)
일자: 2020년 7월 30일 (목) 오후 02시 (한국시간)
언어: 한국어
참석자 접수신청하기

  댓글 0
등록
 
목록
(주)비아이코퍼레이션
관련링크
배상수 님 전체논문보기 >
관련인물
관련분야 논문보기
Structural_Biology

외부링크
Google (by Sangsu Bae)
Pubmed (by Sangsu Bae)
제품평가
[비아이코퍼레이션]
e브릭몰(연구용 제품 온라인 구매 사이트)
제품이미지
모집인원: 50명
모집기간: ~7/15
신청조건: BRIC 회원
평가자 혜택

- 참가자 전원 3만원 상품권 제공

제품평가자 모집중
프리미엄 Bio일정 Bio일정 프리미엄 안내
[BRIC Webinar]3차원 이미징의 최적 솔루션, THUNDER Computational Clearing 기술 소개[Leica Microsystems]
[BRIC Webinar]연구 속도를 높일 수 있는 공초점 플랫폼 STELLARIS 기술 소개[Leica Microsystems]
위로가기
한빛사 홈  |  한빛사FAQ  |  한빛사 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크