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박인현 (In-Hyun Park) 저자 이메일 보기
Yale School of Medicine
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Modeling and correction of structural variations in patient-derived iPSCs using CRISPR/Cas9

Chul-Yong Park1-4, Jin Jea Sung1,2,4, Sang-Hwi Choi1,2, Dongjin R Lee1,2, In-Hyun Park3 & Dong-Wook Kim1,2

Department of Physiology, Yonsei University College of Medicine, Seoul, Korea. 2Brain Korea 21 Plus Project for Medical Science, Yonsei University College of Medicine, Seoul, Korea. 3Department of Genetics, Yale Stem Cell Center, Yale School of Medicine, New Haven, Connecticut, USA. 4These authors contributed equally to this work.

Correspondence to : In-Hyun Park or Dong-Wook Kim

Genome engineering technology using engineered nucleases has been rapidly developing, enabling the efficient correction of simple mutations. However, the precise correction of structural variations (SVs) such as large inversions remains limited. Here we describe a detailed procedure for the modeling or correction of large chromosomal rearrangements and short nucleotide repeat expansions using engineered nucleases in human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) from a healthy donor and patients with SVs. This protocol includes the delivery of engineered nucleases with no donor template to hiPSCs, and genotyping and derivation/characterization of gene-manipulated hiPSC clones. With engineered nucleases, genomic inversions, reversions, and deletions of short nucleotide expansions can be identified in 2 weeks, and desired clones can be generated in as little as 3-4 weeks. This protocol enables the correction of large inverted segments and short nucleotide repeat expansions in diseases such as hemophilia A, fragile X syndrome, Hunter syndrome, and Friedreich's ataxia.

- 형식: Research article
- 게재일: 2016년 10월 (BRIC 등록일 2016-10-10)
- 연구진: 국내(교신)+국외 연구진태극기
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발표: 김현민 (KAIST)
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