실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
-
레벨5
하늘을달려라
-
09.07.20 02:38
올래는 glycolysis과정에 관여하는 enzyme인데,...
그 발현량이 약물등에 의해서 잘 변하지 않습니다..
그래서 요런 house keeping gene들을 intra cellular control로 사용합니다.
즉...님이 로딩을 하였을때
각각의 웰에 로딩이 일정하게 되었다는것을 보여줄수 있어요
beta-actin, tubulin 같은 house keeping gene입니다 .
대부분의 세포와 조직에 이들 유전자와 단백질들이 발현되어서
그걸 control로 사용하는 겁니다.
house keeping gene은 세포내에서 일정하게 발현되는 유전자 입니다.
따라서 house keeping gene의 양을 확인함으로서 같은양의 RNA가 실험에 사용됬다라는것을 입증해주는 것입니다.
만약 house keeping gene의 RT-PCR 합성후 전기영동시 밴드 진하기가 다르다면 다른양의 cDNA로 실험을 진행했다는 의미로 실험결과의 신뢰성을 입증하지 못하게 됩니다
-
GAPDH
(비회원)
-
09.07.22 12:09
Cell cycle이나 실험 조건에 의해 유전자의 발현량 (mRNA 혹은 단백질)이 어떻게 변하는지를 비교할 때 세포내에서 발현량이 잘 변하지 않는 유전자를 기준으로 연구하고자 하는 대상을 비교하게 됩니다.
세포내에서 구조 유전자나 생명현상에 필수적인 대사에 관여하는 유전자 등은 세포의 조건에 따라 발현량이 잘 변하지 않는 것들입니다. 이렇게 세포내에서 거의 항상 발현되면서 그 발현량이 세포의 조건에 따라 잘 변하지 않는 것을 house keeping gene이라 합니다. 잘 알려진 house keeping gene으로는 beta-actin이나 GAPDH 같은 것들이 있습니다.
GAPDH는 Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase의 약자로 세포에서 필수적인 대사과정인 glycolysis에 관여하는 효소이며, 세포내에서 항상 발현되면서 그 발현량이 잘 변하지 않는 유전자입니다. 이러한 유전자는 세포내에서 발현량의 변화를 조사하고자 하는 대상 유전자에 대해서 좋은 세포내 기준이 됩니다. 각 조건별 유전자 발현량을 비교할 때 GAPDH는 각각의 실험 조건에서 template가 되는 RNA 나 단백질량을 동일량 사용했는지를 보여주는 기준이 될 수 있습니다.