실험 Q&A Plant Biology > Transformation
E.coli에서 효소정제시 sonication
답답이 (비회원)
transformation 시킨 E.coli 에서 효소 추출하고 있는데요..
sonication으로 단백질 깨주는데...
저희 실험실에 있는 소니케이터가 굉장히 오래됬거든요..15년정도 된 모델이라는;;;
끝에 프로브 직경이 3mm 정도구요~
10mL에 소니케이터 끝부분이 거의 잠기게해서 10초 충격주고 50초 쉬어주고 해서...
30분간 하고 있습니다~
파워는 60kHZ로 하고 있구요..
근데 잘 안깨지는거 같아서요...나중에 효소활성 체크해보면 굉장히 낮아서...
문제는 단백질이 덜깨지는것 같아서 그런거 같아요...
소니케이션 파워를 어느정도해서 시간을 얼만큼 해야 하는지...감이 도저히 안잡히네요...
혹시 논문이라도 있는지...정말 답답한 마음에 처음 글 올려봅니다.ㅠㅠ
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