실험 Q&A Chemical biology > Extraction/Concentration
enzyme purification & activity
enzymeㅠㅠ (비회원)
enzyme을 정제하였습니다
vector : pet14b, his tag
DNa : mouse 유래
protein size : 47Kda
qiagen ninta 사용
sonication : 50mM Tris , 300mM NaCl
wash : 50mM Tris, 30mM imidazole, 300mM NaCl (500ml)
elution : 50mM Tris, 100mM imidazoel, 300mM NaCl
받고난후 전기영동결과 protein 존재
activity 측정시 activity 나옴
문제는 protein을 얼렸다 녹이면 활성이 사라짐, 전기영동 내려보면 밴드는 있음
centricon으로 농축시켜도 활성이 사라짐..ㅠㅠ
어떻게 해야되나요...
살려주세요ㅠㅠ
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