enzyme cut이 안되는 것은 몇가지 요인이 있는걸로 알고있는데요

우선 enzyme 자체의 활성문제..

그리고 buffer의 문제

또한 methylation의 문제 입니다.


효소의 활성의 경우 두개의 효소를 사용하시니까요

각각으로 잘라봐서 사용하시는 버퍼에서 잘 잘라지는지 cross로 확인해 보아야

합니다.

그리고 버퍼문제는 새거 써보시면 될 것이고요 물론 반응하는 용매(보통 DIW)

의 순도도 중요하겠지요. 가끔 다른건 되는데 안되는 애덜이 있더라고요

끝으로 DNA자체의 문제중 methylation 에 관한것은

enzyme에 대한 정보를 찾아보시면 될듯합니다.

이상 허접한 답변이었습니다.

아참...

그리고 37도에서 밤새 반응하는 시키는 것이 꼭 일반적이지는 않습니다.

경우에 따라서 enzyme 자체가 37도에서 활성이 오래가지 않는 경우도 있고

혹은 특이 조건에서 star활성을 가져서 막 자르고 다니는 경우도 있으니까요.