실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
Enzyme cut 이후 Gel purification에서 Insert와 Vector의 농도 차이
레벨1 시월이 (대학생)
안녕하세요 저는 학부생으로 아직 실험적인 개념이 다소 낮다는 점 우선 말씀드립니다.. ㅜ Cloning 실험을 하는 중에 Gel purification 후 정량을 측정했는데 Insert와 Vector의 농도 값의 차이가 많이 납니다. 제가 전기영동 후 Gel을 잘라낼때 Insert가 Gel 구멍에서 옆칸으로 세어나가는 바람에 무게에서부터 많이 나가긴했는데.. 정제할때도 애를 먹었고 이때문인지 최종 콜로니도 뜨지않더라구요.. Insert 260:280 = 1.046 -> 농도 228.600ng/ul Vector 260:280 = 1.872 -> 농도 45.300ng/ul 이유가 무엇인지 혹시 예측이 가능할지, 또 이같은 농도 차로 인해 Ligation에서 문제가 생길 수 있는지 궁금합니다..!
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