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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 Antibody 만드는 법
알binbean(대학생)  | 05.22 03:04

선생님들 안녕하세요! western blotting 공부하면서 갑자기 생긴 의문이 있습니다!

 

antibody probing할 때 primary antibody를 실험실에서 직접 골라 사용한다고 들었는데요, 정확히 어떤 방식으로 만드는지 궁금합니다!

또한 antibody를 만들 때 target하고 싶은 protein의 정보가 어느정도 필요한지도 궁금합니다!

 

읽어주셔서 감사합니다 :)

#antibody
 
#primary antibody
 
#antibody staining
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대왕개구리강시  |  05.22 10:04  

이건 공부 좀 해야하는 내용입니다.

우선 target 단백질을 분리해서 가지고 있어야 합니다. 최소한 부분정제상태라도....

분리정제가 어렵다면 epitope 부분의 peptide 를 합성해서 사용할 수도 있습니다.

target 단백질을 쥐, 생쥐, 토끼 등에 아주번트와 함께 주사해서 면역반응을 유도해야 합니다. 그러면 단백질을 주입받은 동물이 항체를 만듭니다. 

그 동물의 피를 뽑아서 혈청을 분리하면 그것을 polyclonal antibody라고 부릅니다.

좀 더 정확한 실험을 위해서는 monoclonal antibody를 만들어야 합니다.

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