실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
웨스턴 끌림현상 제발 도와주세요ㅜㅜ
레벨3 쿵쿠따리쿵쿠따 (대학원생)
20kDa 12% gel로 detection한 membrane 인데요,, 이게 옆으로 쭉 끌려서 디텍션이 되었습니다 ㅜㅜ 2번 했는데도 2번 다 똑같이 나왔어요 ,,
이 부분 어떻게 해결하면 좋을까요 ,,? SDS 내릴 때, 바닥까지 끌지 말고 20kDa marker가 2/3쯤 내려왔을 때 스탑하고 다음단계 이어가면 되나요..? 답답해서 미치겠습니다 ㅜㅜ 저와 같은 경험 있으신 분 조언 주시면 감사하겠습니다!!
아 그리고 beta actin 같은 control이 일정하지가 않은데, sampling 후 voltex하고 spin down 후 heat 하고 식힌 다음 로딩을 하는데, 이 부분이 해당 결과에 많은 원인이 될 수 있을까요? (원랜 heat->볼텍싱->스핀다운->로딩 순으로 알고 있어서요!, 순서 약간의 차이가 원인이 될 수 있는지 궁금합니다!)
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