항체가 붙어야 하는 단백질 타겟은 매트릭스에 고정되어 있어야 합니다. 그래서 단백즐을 membrane으로 이동시키는 겁니다.
SDS-PAGE에 있으면 확산되서 항체가 붙어도 서서히 사라집니다.
웨스턴의 목적이 단백질 band를 보는 것이고 그를 위해 항체를 붙이는 것이 중요한 과정입니다
gel 안에 단백질이 있으면 항체가 결합할 수 없고, 보관도 짧고 어려워요
그래서 오랜 보관이 가능하고 쉬운 membrane으로 단백질을 옮겨 추가 실험을 진행합니다
- 다른 이유 보다 gel안에 단백질이 있으면 membrane과 동일하게 항체가 단백질에 균일하게 결합하지 못합니다.
- SDS-PAGE gel에서 단백질이 그리 쉽게 확산되지 않으며 전기영동을 동일하게 3장해서 전기 영동 후 0일 1일 3일에 후에 각각을 염색해보면 알수 있습니다.