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유도 promoter를 사용한 단백질 발현은 적정 발현시간이 있으며 길게 배양한다고 계속 생산되지 않습니다.
구성 promoter를 사용하면 배양 할 수록 발현양이 많아집니다.
현재 활성이라고 하면 효소를 생산하나요?
활성은 이미 생산된 단백질도 시간이 길어지면 실활됩니다.
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레벨5
기적
(대학원생)
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23.03.29 17:54
speed님 매번 감사드립니다.
단백질 발현 중이며 500 mL를 18도에서 21시간 (overnight) 발현했을때는 total soluble 발현량이 적어 2일동안 발현했을땐 발현량이 확 늘어나는 것을 확인하였습니다 (약 5배 이상 차이)
이런 경우 18도에서 2일 배양하여도 단백질 활성에 문제는 없는지가 궁금합니다.
답변 기다리고 있겠습니다. 감사합니다.
- 이런 경우는 1, 2, 3일 sampling 해서 단백질 양, 활성을 확인한 후 배양 시간을 정하는 것이 좋습니다.
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레벨5
기적
(대학원생)
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23.03.30 11:19
감사합니다! 확인해보겠습니다!!