안녕하세요. serial dilution 재현성 관련해서 고민이 많은 초보 연구원입니다.

제가 스탁 농도가 1.59mg/ml 인 recombinant를 희석해서 사용하는데요, 200ng부터 2배씩 serial dilution 하고있습니다.

그런데 항상 25ng, 12.5ng에서 값이 튀는게 문제입니다. serum을 dilution buffer로 사용하고있어서 serial dilution 하면 팁에 차고 올라와서 2배씩 내릴때마다 10초 기다려서 안에 차오르는거 다시 넣고 볼텍싱해서 하고있어요. 

현재 정량하려고 하고있는데 정량곡선 그리면 항상 25ng, 12.5ng이 추세선보다 위에 존재합니다. 그래서 R제곱값도 계속 떨어지구요. 

다들 serial dilution 어떻게 하시는지 궁금합니다. 개선점이 있을까요?