실험 Q&A Microbiology > Bacteria
박테리아 세포 감염 실험 질문드립니다.
레벨2 BeckG (대학생)
안녕하세요 박테리아로 실험을 해본적이 없어서 궁금하게 생겨서 질문 드립니다.
참고하려는 논문에서는 박테리아를 LB에 오버나잇 해서 키우고, (일반적인 신체 조직유래 세포 배양할 때 쓰는) 세포 배양액 (논문에서는 interaction media; IM라고 부름)에 1:100으로 희석 후 OD600이 0.2-0.4가 될때 까지 키우고 세포당 박테리아 수 (multiplicity of infection; MOI)를 계산해 세포에 처리 합니다.
1. E.coli의 경우 보통 OD 0.1에 2 x 10^8개가 들어있다고 하는데 만약 OD 0.2 까지 (4 x 10^8) 키우고 1 x 10^4 개의 세포에 MOI 100만큼 (박테리아 수 1 x 10^6개) 감염시키려고 하면 어떻게 해야하나요? 그냥 시약 농도 희석하는 거랑 똑같이 OD 0.2를 400배 희석해서 세포에 처리 하면 될까요? 예를들어 OD 0.2 100 ml가 있고 총 24 ml이 필요하다면 60 ul (OD 0.2) : 23,940 ul (IM) = 24,000 ul = 24 ml이렇게 희석하면 될까요?
2. IM에 박테리아 배양시 phenol red가 들어있는데 박테리아 흡광도에는 큰 영향이 없을까요?
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