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BioLab 최정욱 교수
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 전체 > Microbiology > Bacteria
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질문 bacteria OD600 vs CFU/ml 측정
알친절하게살자(대학원생)  | 02.14 16:47

안녕하세요

프로바이오틱스 실험을 하기위한 균주의 OD600 vs CFU/ml를 측정하려고 하는데요

OD600=4일때 1x10^9 CFU/ml라면 OD600=0.4일때 1x10^8 CFU/ml가 맞는지 궁금합니다.

아니라면 이유도 알려주시면 감사하겠습니다.

#bacteria
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리강시  |  02.14 22:28  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

단순한 계산으로는 OD600=4일때 1x109 CFU/ml라면 OD600=0.4일때 1x108 CFU/ml가 맞습니다. 하지만 OD600 값은 2 이상 올라가면 saturation 되기 시작해서 cell density를 비례적으로 표현하지 못합니다.

그래서 OD600=4일때 1x109 CFU/ml라도 OD600=0.4일때 1x108 CFU/ml가 아니라 훨씬 CFU 값이 적을 수 있습니다.

다시 말하면 OD600=4 가 OD600=2의 두배가 아니라는 거죠. 4배나 5배가 될 수도 있습니다.

그래서 OD600 값이 cell density와 비례하는 구간을 정해서 cell density를 측정합니다. 가령 OD600 값이 2 이하 구간을 사용한다던지.... 

대왕개구리SPEED  |  02.14 22:47  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
이론적으로는 4배 차이가 나지만 실제 광학적 방법으로 측정하면 4OD는 실제로 4OD 이상의 값이기 때문에 10배 희석하면 0.4OD 이상이 나옵니다.

이유는 일정 OD값 이상으로 올라갈수록 분자 중첩 현상이 발생하여 실제 분자수 보다 적은 OD수치가 나옵니다.

이것은 광학측정 장비의 한계입니다.

따라서 낮은 측정값으로 측정해서 희석비를 곱하는것이 좀더 정확한 값이 나옵니다.

1이하값을 사용하는것이 정확할 겁니다.

예로 2OD를 2배, 4배, 6배, 10배 희석해서 측정 해보면 알수 있습니다.
알친절하게살자  |  02.15 09:51  
OD600=4 값은 희석해서 흡광도 1 이하로 낮추고 측정한 값입니다 답변 감사합니다!
대왕개구리SPEED  |  02.15 09:57  

- 실제 측정한 희석 OD와 cfu값이 어떻게 되나요?

알친절하게살자  |  03.24 17:26  

제가 너무 늦게 확인했네요... 

제가 실험하고 있는 균은 OD=4일때 10^9 정도 나왔습니다.

OD값은 균체를 물에 10배 희석해서 잰 값입니다 ^^

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