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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 Agarose 전기영동할때 sample이 퍼집니다.
알nuco(대학원생)  | 02.06 18:15

DNA 전기영동하려고 Agarose gel에 로딩하려고 하는데

sample이 가라앉지 않고 TAE buffer안에서 퍼져서 확산됩니다.

PCR product는 아니고 mRNA 합성한것 내려본 것입니다.

샘플이 날라가버렸는데 어떤 컨디션이 안맞는걸까요?

#Electrophoresis
 
#RNA
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
--  |  02.06 18:43   

loading dye와 template를 잘 섞은 것인데도 well 안에 분주가 안되는건가요?

꽃개구리착한사람  |  02.06 19:37  

혹시 gel 만들때 콥을 굳어버리기전에 꽂으신거 맞으세요?

제가 깜빡하고 콥을 gel이 좀 굳은 다음 힘줘서 꽂아서 만든적이 있었는데

나중에 전기영동해보니 말씀하신 증상이 일어난적이 있었어요 

꽃개구리착한사람  |  02.06 19:39  

원인을 모르시겠다면

gel을 다시만들어서 해보시는걸 추천드립니다. 

--  |  02.06 19:56   

저도 착한사람님 말에 동감하네요 저도 저번에 gel 제작시 너무 식은 상태에서 comb을 꽂은 적이 있었는데 이 경우 well이 깔끔하게 제작되지 못했는지 well에 분주할 때 쌓인다는 모습이 아니라 well 안에서 울퉁불퉁 퍼지는 경우를 보았습니다. 좋은 결과 있으시길 바라겠습니다. 

대왕개구리SPEED  |  02.06 23:01  
well에 문제가 없다면 loading buffer, sample조성에 문제가 있을 겁니다

전기영동에 정제한 시료를 사용했나요?
꽃개구리bio  |  02.07 01:52  

loading dye확인해 보셨나요?

glycerol넣지 않으면 가라앉지 못하고 퍼지기도 합니다.  

대왕개구리강시  |  02.07 09:04  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

DNA 시료에 EtOH 이 남아 있으면 그런 형상이 일어납니다.

또는 DNA가 농도가 좀 높은 gDNA일 경우 역시 그런현상을 보입니다.

 

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