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질문 세포동결 할 때 vial 안으로 들어가는 액체 질소
올챙이마징가도리(대학원생)  | 02.01 11:35

cryo vial을 사용중인데, 동결 시 바이알을 꽉 잠그고 -80도에 보관 후, 액체질소(liquid nitrogen)로 옮깁니다. 동결 후 풀면 세포 상태가 너무 안좋고 붙어있는 셀 양도 별로 없어 질문남깁니다 ㅠㅠ 

1. 동결을 풀기위해 액체질소에서 꺼내면 vial안에 액체질소가 들어서 부글부글 끓는 것이 보입니다. 정상인가요..?
그리고 꽉 닫았던 뚜껑들도 뚜껑이 얼어 다 헐렁헐렁해져서 살짝만 힘줘도 열려버립니다... 

2. 안에 액체질소가 들어가더라도 세포는 사용이 가능한가요?? 액체질소에 닿으면 세포에 타격이 가나요..

3. 안에 들어간 액체질소를 빼주고 사용해도 된다면, 뚜껑을 열지않고 엎드리기만해도 액체질소가 빠져나오던데 이렇게 빼주면되나요 아니면 꺼내자마자 뚜껑을 살짝 열어 빼주면 되나요..? 
 * 저는 액체질소에서 빼내서 실험실로 가져가 바로 37도에 녹입니다. 닫힌상태에서도 증발이 된다면 녹이는 과정이나 들고옮기는 과정에서 다 날라가지않나요..?? 근데도 세포가 이상해서 ㅠㅠㅠ 

#thawing
 
#cryogenic vial
 
#freezing
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
dd  |  02.01 12:43   

1. 저는 막 엄청 헐렁해지진 않긴하던데...

2. 지금까지 했을 때 액체질소로 vial 안이 가득 안이 차는건 아니였어서 별 문제는 없었어요

3. 전 늘 꺼내서 뚜껑 살짝 열어서 뺴주고 37도에 빠르게 녹이고 풉니다.

 

상태가 안좋다면 혹시 -80도 얼리실 때 container 를 어떤거 쓰셨는지에 따라 다를 수도요? 1시간에 1도씩 떨어지는 isopropanol 들어가는 container 를 쓰셨나요? 

good luck  |  02.01 13:41   

충분한 양의 세포를 얼렸나요?

평소 루틴하게 해 오던 cell freezing-thawing이 이번만 이상해진 것인가요?

Freezing-thawing test를 통해 애초에 cell freezing이 정상적으로 되었다는 것을 확인했나요?

액체질소가 의심된다면 -80'C deep freezer에 얼린 후 thawing을 해보았나요?

1. 물이 끓는점에서 끓듯이 액체질소도 끓는점보다 높은 온도인 상온에서 끓는 것으로 정상적인 화학반응입니다. 뚜껑은 신경 쓰지 않아도 됩니다.

2. 액체질소 들어가도 상관없습니다. 세포를 녹이면서 액체질소는 기화하여 먼저 없어집니다. 액체질소에 세포를 보관했는데 닿으면 타격이 가냐고 묻는 것은 아이러니입니다.

3. cell thawing 중 액체질소는 기화하여 없어집니다. 뚜껑을 여는 것이 컨탐 위험이 있어 더 좋지 않습니다.

아이에스에스  |  02.02 10:36   

안녕하세요.

아이에스에스입니다.

vial이나 추후 cell Viability때문에 고민이시라면, 

cryo-gold 저희 제품 참고부탁드립니다.

사용설명서 또한 나와있으니 도움이 되시지 않을가합니다.

감사합니다.

https://insungscience.com/forum/view/472056

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